基于酶-抗体共固定二氧化锆纳米信号探针的瘦肉精安培免疫传感器.pdf

第41卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第6期 2013年6月 ChineseJournalof 828—834 AnalyticalChemis扛y 基于酶-抗体共固定二氧化锆纳米信号探针的 瘦肉精安培免疫传感器研究 詹盼 杜晓雯 干宁+ 林赛钗 李天华 曹玉廷 桑卫国 (新型功能材料及其制备科学国家重点实验室基地，宁波大学材化学院，宁波315211) 摘要制备了基于酶一抗体共固定二氧化锆(ZrO：)纳米探针进行信号放大的盐酸特伦克罗瘦肉精(CLB)检 测安培免疫传感器。首先，利用ZrO：纳米粒子负载葡萄糖氧化酶(Glucose buterol antibody，anti-CLB)，制得纳米探针(ZNPs／GOD．anti．CLB signalprobe，简称ZNPG)。同时将聚二烯丙 基二甲基氯化铵[Poly(diallyldimethylammonium 层组装到多壁碳纳米管(MWCNTs)修饰的丝网印刷电极(SPCE)表面，制得SPCE AuNPs)。电流型传感器，可对H：O：产生还原催化电流。检测CLB时，将样品和ZNPG一起加入预先包埋好 糖，板底ZNPG—CLB免疫复合物上的GOD催化葡萄糖氧化产生H，O，，可通过传感器检测。电流下降值(△，)与 样品CLB成反比，可用于CLB的定量分析。由于ZNPG上具有高的GOD酶标记密度，故可以显著放大检测信 7．0，温育时间30min，温育温度37℃)，此传感器对CLB的检测范 号，提高检测灵敏度。在最佳条件下(pH 围为0．003～100斗∥L，检测下限为1ng／L，比酶联免疫分析法(ELISA)法灵敏度提高2个数量级，在猪饲料 样品中进行加标回收实验，平均回收率达93．6％，相对标准偏差(RSD)小于2．5％，精密度好。同时该传感器 具有可重复使用、灵敏快速，适合于食物样品中痕量CLB现场检测。 关键词竞争性酶联免疫分析；瘦肉精；酶一抗体共固定二氧化锆纳米探针；信号放大；安培免疫传感器 1 引 言 健康产生极大影响。因CLB可以提高瘦肉率，一些不法商贩将其添加到动物饲料中，造成极其恶劣影 响。许多食品检测机构已将瘦肉精列为常规检查之一【1，2]。传统的CLB分析方法包括高效液相色谱 3等，检测虽 immuno 然准确，但由于分析仪器较大，不适用于CLB现场快速分析。酶联免疫分析法(Enzyme．1inked sorbent 点，已开始应用于痕量CLB的检测∞1。传统的ELISA由于采用酶标仪检测，不仅灵敏度有限、且体积庞 大，易受样品颜色干扰，不适合于现场使用；而电化学分析法因其仪器便携、灵敏快速、抗杂色干扰等优 测的优势相结合，将非常适合于构建食物样品中痕量CLB的在线分析技术一]。 葡萄糖氧化酶(Glucose buterol 大量H：0：的电化学传感器报道¨1’12 carbon 由于环境水体中CLB含量极低，为进一步提高电化学免疫分析灵敏度，有必要提高信号探针上的酶标 2012．1 1-18收稿；2012．12-25接受 1 (No．201A610006)和宁波大学王宽诚幸福基金资助 }E-mail：ganning@nbu．edu．cn 万方数据 第6期 詹盼等：基于酶．抗体共固定二氧化锆纳米信号探针的瘦肉精安培免疫传感器研究 ZnO，TiO：等)纳米材料，因其具有比表面积大、生物相容性好、具有路易斯强酸性质等优点，可作为酶、 抗体等大分子蛋白的优良载体H CLB．