4第四章药物定量分析与分析方法验证.ppt

第一节定量分析方法的分类与特点 一、容量分析法 结果计算 1、滴定度 滴定度（T）的概念 每1ml某摩尔浓度的溶液相当于被测物质的重量(mg)。 滴定度的计算 aA + bB cC + dD T = M×b/a×B 2. 含量测定 (1) 直接滴定法 (2) 生成物滴定法 （3）回滴定（剩余滴定） （a）不做空白试验时百分含量计算 （b）做空白试验时百分含量计算 二、光谱分析法 三、色谱分析法 一、不经有机破坏的方法 （一）湿法破坏 凯氏定氮法 以硫酸-硫酸盐为基础 常量法、半微量法 ChP主要应用本法测定含有氨基或酰胺（氨）结构药物的含量 习题： 1、如何证明蒸馏器已洗干净？ 2、蒸馏步骤中如何保证氨气全部被硼酸溶液吸收？ 3、凯氏定氮可否用于鉴定牛奶中是否存在三聚氰胺？为什么？ 第三节 药品质量标准分析方法验证 一、准确度（accuracy）： 测量值与真实值接近的程度 表 示: 回收率 测定方法：回收试验 加样回收试验 （一）含量测定方法的准确度 1、原料药 2、 制剂 （1）用含己知量被测物的各组分混合物进行测定，即采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法。 三、专属性（specificity）: 指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性)。 药物能被检出的最低浓度(μg/ml) 测 定: 信噪比法(S:N=3:1) 五、定量限 六、线性 七、范围 八、耐用性 九、验证内容的选择 检验项目和验证内容： 药品分析方法验证内容 习题： 1、如何证明蒸馏器已洗干净？ 2、蒸馏步骤中如何保证氨气全部被硼酸溶液吸收？ 3、凯氏定氮可否用于鉴定牛奶中是否存在三聚氰胺？为什么？ 药品分析方法验证内容 练习与思考 验证内容选择的一般原则: 非定量分析方法 如鉴别,杂质的限度检查法: 验证“专属性”,“检测限”和“耐用性” 定量分析方法 如原料药或制剂的含量测定及含量均匀度,溶出度或释放度的测定方法: 除“检测限”和“定量限”外, 其余均验证 微量定量分析方法 如杂质的定量测定方法: 除“检测限”视情况而定外, 其余均验证 ＋ ＋ ＋ 耐用性 ＋ ＋ 范围 ＋ ＋ 线性 － ＋ 定量限 － ＋ －③ 检测限 ＋ ＋ ＋ ＋ 专属性② ＋① ＋① 中间精密度 ＋ ＋ 重复性 ＋ － 精密度 ＋ ＋ 准确度 限度 定量 含量测定及溶出量测定 杂质测定 鉴别 　　　项目内容　　　 ① 已有重现性验证，不需验证中间精密度 ② 如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充 ③ 视具体情况予以验证 各种含量测定方法对效能指标的要求 1. 容量分析法： 用原料药精制品(含量99.5％)或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于0.2％；进行回收率试验。 回收率一般在99.7～100.3％之间。 2. UV法： 用适当浓度的精制品进行测定，其RSD一般不大于1％。 制剂的测定，回收率一般应在98％～102％之间。 线性： 吸光度A一般在0.2～0.7，浓度点n＝5。用浓度c对A作线性回归处理，得一直线方程，R应大于0.999(n＝5)，方程的截距应近于零。 3. HPLC法： 要求RSD2％，回收率98％～102％之间。 线性范围： 用精制品配制一系列标准溶液，浓度点n应为5～7，用浓度c对峰高h或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，R应大于0.999，截距应趋于零。 专属性： 要考查辅料、有关物质或降解产物对主药的色谱峰是否有干扰，如有干扰应设法排除。 生物样品分析时，常用RSD表示精密度，并可细分为批内（或日内）精密度及批间（或日间）精密度。 批内精密度：是同一次测定的精密度。所得RSD应争取达到5％以内，但不能超10％。 批间精密度：是不同次测定的精密度。所得RSD应控制在15％以内。 附录《药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则》规定一般RSD应小于15%，在LOQ附近RSD应小于20%。 准确度 耐用性 精密度 专属性 线性与线性范围 检测限与定量限 Text 仪器与材料 ①仪器装置 燃烧瓶为500、1000或2000ml无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状 ②称样用材料及称样 A. 固体样品 无灰滤纸 B. 液体样品 纸袋