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动物微生物学实验5
实验五 真菌的分离培养及形态观察 一.目的要求 1.掌握真菌分离培养方法。 2.认识真菌菌落的特征,比较与细菌菌落有何不同。 3.了解真菌载片培养法。 4.掌握观察真菌的基本方法,并观察其形态特征。 二 基本原理 霉菌的营养体是菌丝体,分为基内菌丝和气生菌丝。生长到一定阶段时,气生菌丝中又可分化出繁殖菌丝。不同的霉菌其繁殖菌丝可以形成不同的孢子或子实体。 霉菌菌丝有无横隔膜,其营养菌丝有无假根、足细胞等特殊形态的分化,其繁殖菌丝形成的孢子着生的部位和排列情况,以及是否形成有性孢子等,是鉴别霉菌的主要依据,镜检时应仔细注意观察。 霉菌菌丝生长比较松散,其菌落多呈大而疏松的绒毛状或棉絮状等特征。 酵母菌为不运动的单细胞真核微生物,细胞呈圆形、卵圆形或假丝状等形态,菌体较细菌大。繁殖方式也较复杂,分为无性繁殖和有性繁殖。形成的菌落与细菌菌落相似,但比细菌菌落大而且较丰厚。菌落呈圆形、湿润具有粘性、不透明、表面光滑、有油脂状光泽,多数白色或乳白色,少数红色。与培养基结合不紧,易被挑取。当培养时间较长时,菌落颜色变暗,有特殊的酒香味。 三.试剂与器材 1. 器材 显微镜、解剖针、接种环、镊子、载玻片、盖玻片、灭菌玻璃纸、酒精灯、无菌平皿、手持放大镜。 2. 培养基 马铃薯蔗糖琼脂培养基(灭菌备用) 、灭菌麦芽汁琼脂培养基 3. 菌种 在马铃薯蔗糖琼脂平板上培养3-5d的根霉、毛霉、青霉及曲霉。黑根霉(+)和(-)各一管。啤酒酵母 。 4. 试剂及染色液 乳酸、石炭酸、棉兰染色液 四.操作步骤 (—)、真菌的分离培养方法 1.平板划线分离法 2.稀释分离法 (二)、真菌培养性状观察 (三)、 真菌的形态观察 五 注意事项 注意整个操作过程需要无菌操作. 六 实验结果 如下图 霉菌的菌落 酵母菌的菌落 啤酒酵母 菌丝分枝顶端细胞或菌丝分化来的分生孢 子梗的顶端细胞分割而成的单个或成簇孢子。 Conidiospores Conidiospores 黑曲霉 黑曲霉(可引起烧伤病人皮肤感染或真菌性肺部感染
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