非细胞体系细胞核重建研究进展.pdf

非细胞体系细胞核重建研究的进展 查堡 主查 一 。 (北京大学生物学系 100871) 8O年代中期以来，国外有几个 实验室 陆 近年，我们实验室也开展了非细胞体系细 续建立起一项新的细胞生物学研究技术，称为 胞核重建研究工作，在国内首次建立了非细胞 非细胞体系细胞核重建 或 核 重 组 装 (nuclear 体系细胞核重建实验模式，并利用这一模式开 reassembly ’or rec0nstituti0n in cell-freesyst- 展了一些相关的研究，如在重建核的核骨架与 ems)。它是在没有完整的细胞结构的情况下， lamina、核孔复合体组装与染 色 质 组 装 等方 将构建细胞核的各种 “原料”及有关细胞质成份 面，均取得了一些初步的但又令人感兴趣的结 人为地混合在一起，并经过一定 方 式 进 行诱 果。 导，使混合物 自发构建细胞核的一 项 研 究技 本文试 图对非细胞体系细胞核重建研究的 术。这项技术的建立 与应用，加深了人们对细 概况，并适当结合我们 自己的工作体会，作一 胞核重建过程的认识，如细胞核 各组 分 的组 简要介绍。 装，各组分在组装过程中的相互作用，尤其在 一 、 非细胞体系细胞核重t 染色质与核膜、lamina相互关系等方面获得了 ． 研究技术的t立 在细胞体系内核承建研究所难以取得的研究成 果。同时，人们应用这一技术，对重建核的生 1983年，Lohka和Masui在 S‘‘cience”上首 物活性和重建核对细胞周期调 节 因素 的反应 次报道，将去除核膜的精子染色质与蛙卵提取 等，进行了较为深入的探讨，提出了许多重要 物一起温育，可以共同构建成雄原核。这种核 论点。 不仅具有典型的细胞核结构，而且在一定条件 与非细胞体系细胞核重建研究技术相对应 下可以进入M期 ¨。这一研究工作在国际上首 的是一些在完整细胞水平上进行的研究技术， 次解决了用染色质诱导非细胞体系细胞核重建 如在普通光镜下观察核周期的变化，在 电镜下 研究的技术 问题。 研究核周期中不同时期的细胞超微结构[1】，抗 同年，Forbes等人报道，将纯化的lambda 核物质抗体显微注射技术[z】，免疫荧光术[3】， DNA注射到成熟的蛙卵中，发现 有含 lambda 等等。这些技术在细胞核重建研究中无疑地起 DNA的细胞核形成；如果将 lambdaDNA与成 到了重要作用。然而，非细胞体系细胞核重建 熟蛙卵的提取物一起温育，也发现有含lambda 研究技术不仅能够达到上述技术所能达到的效 DNA的细胞核重建 。这一工作首次解 决了 果，而且具有一系列优越性，在一定程度上能 用外源纯化的DNA诱导非细胞体系 细胞核重 够人为地控制细胞核重建体系 中核物质的种 建这一重要技术 问题 。 类、相互 比例 以及细胞核重建 的 进 程 等。因 上述两项工作为非细胞体系细胞核重建研 此，非细胞体系细胞核重建研究技术更加受到 究奠定了基础。 同 时 也 分别成为后来的两种 科学家们的重视，把它誉为 8O年代 细