乙型肝炎IgM核心抗体定量检测操作规程.pdf

生物秀-专心做生物！ 乙型肝炎 IgM 核心抗体定量检测操作规程 乙型肝炎IgM 核心抗体定量检测（IgM Antibody to Hepatitis B Virus Core Antigen，IgM anti-HBc/CORE-M ） 1．检验目的 检测 CORE-M 主要是诊断急性乙型肝炎、现症感染者(通常 6 个月以内) 的感染状况和 慢性感染(特别是慢性迁延性乙型肝炎) 的活动情况。 2 ．方法原理 采用了美国雅培公司的专利技术——微粒子酶免疫分析（MEIA ），即以 CORE-M （anti-Ab ）包被微粒子（M-Ab ）不可逆结合到纤维杯表面的玻璃纤维上后，与标本中的 CORE-M （Ab ）形成M-anti-Ab-Ab 复合物，通过洗涤去除未结合的部分，加入重组 HBcAg 形成 M-anti-Ab-Ab-Ag 复合物，再与加入的碱性磷酸酶标记 HBcAb 结合，洗去未结合的游 离物质，加入底物——四甲基伞形酮磷酸盐，碱性磷酸酶脱去底物的磷酸基而发出荧光，通 过 MEIA 光路元件检测而得到定量结果。 3 ．性能指标 MEIA 定量检测 CORE-M 不精密度 CVs 为 2.6-8.6% ，检出限1.0 Index ，灵敏度1.0 Index ，特异性优于其他化学发光方法。 物 4 ．标本收集 4 ．1 标本类型：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本（抗凝剂可用肝 生 素钠、枸橼酸钠、ACD 、CPDA-1 或 EDTA ，抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯 易 或分析纯，使用的比例以厂家推荐为准）；其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹 水、乳汁等体液可以作为检测标本，但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。 4 ．2 标本留取：以空腹为宜，收到标本后最好立即离心留取血清或血浆（凝固血应待 其充分凝固后收集血清），不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝，使用肝素治疗的病人宜在肝 素治疗前抽血。 4 ．3 标本保存：留取的标本最好在 3 小时内检测，不能立即检测的应放置于 2-8 ℃最长 达 14 天（可以含有凝块但要密闭以防蒸发），或者-10℃最长达 14 天（不能反复冻融也不能 含有凝块和红细胞）。 4 ．4 标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性 的不同规格的塑料离心管 易生物-领先的生物医药商务平台 生物秀-专心做生物！ 4 ．5 标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（0.5ml 塑料离心管）存 放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8 ℃）或干冰（-10℃） 由专人运送至指定地点指定接收人。 4 ．6 拒收标本：凡与 4.1-4.5 所述内容不符的标本，检验人员应向临床或就诊者说明拒 收标本的原因，并提出解决的方案或建议。 5 ．分析系统 5 ．1 分析仪器：为美国雅培公司提供的 AXSYM 全自动免疫分析仪，仪器校准请参见 仪器操作规程。 5 ．2 分析试剂：为美国雅培公司提供的配套的 CORE-M 试剂盒，规格为 100test/盒， 2-8 ℃贮存，有效期 6 个月；在效期内使用试剂。 5 ．3 定标试剂：为美国雅培公司提供的配套的 CORE-M 试剂盒中所附带，2-8 ℃贮存， 有效期 6 个月；每换一次不同批号试剂均应进行重新定标。 5 ．4 质控试剂：为美国雅培公司提供的配套的质控品，分为高、低二个浓度，2-8 ℃贮 存，有效期 6 个月；每天随常规工作一起检测并保存质控结果，每月一次质控小结，失控要 有记录及纠正的结果。