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第6章 染色体工程 6.1 染色体变异 染色体变异可体现在染色体数目和结构两个方面 6.1.1 染色体结构变异 染色体易位 两条非同源染色体之间部分区段发生互换的现象 染色体缺失 染色体上丢失一个或多个片段。 染色体倒位 一个染色体上的某一区段以180o颠倒的顺序出现在原来的位置 染色体重复 一条染色体上增加了相同的某个区段 6.1.2 染色体数目变异 整倍性改变 染色体数目的改变 非倍性改变 6.2 多倍体与单倍体 6.2.1 定义与特点 6.2.1.1 多倍体 (polyploid) ?定义：是指每个体细胞中含有三个或更多染色体组的个体。常见多倍体有三、四、五、六和八倍体。 ?类型： 同源多倍体 异源多倍体 ?多倍体特点 多倍体与二倍体相比，最显著的特点是形态上的巨大性，代谢更为旺盛。此外，糖类、蛋白质及其它产物的含量也有所提高。由于多倍体动物具有生长速度快、成活率高及抗病能力强等特点，所以，可通过人工诱导多倍体来改善动物经济性状。 6.2.1 定义与特点 6.2.1.2 单倍体(haploid) ?定义：不论细胞本身含有几个染色体组，只要细胞中含有正常体细胞的一半染色体数，即具有配子染色体数目的个体都叫单倍体。 ?特点： 6.2.2 多倍体产生的途径 （1）原种或杂种所形成的未减数配子（即配子内保持原种或杂种的合子的染色体数）的受精结合。 （2）原种或杂种的合子的染色体加倍。 6.2.3 动植物多倍体的特点比较 6.2.3.1 动物 与植物相比，动物中的多倍体现象比较罕见。 原因： ?动物的远源杂交能力很弱 ?可能与染色体的性别决定有关 6.2.3 动植物多倍体的特点比较 6.2.3.2 植物 与动物相比，植物中的多倍体现象非常普遍。 原因： ?植物的远源杂交能力很强。 ?植物可以采用营养繁殖或有性繁殖的方式产生后代。 6.3 染色体工程 染色体变异在自然界里经常发生，但是频率较低。为了增加变异的几率，可以利用各种物理（如射线、超声波、高温等）和化学药剂（如秋水仙素等）人工诱发染色体变异，这样得到的诱发频率要高出自然突变几率的几百倍甚至几千倍。于是出现了染色体工程这门技术。 染色体工程技术 定义：按照一定的设计，有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体的技术，从而达到定向改变遗传性和选育新品种的目的。广义上讲它还应包括染色体内部的部分遗传操作技术，因此也称为染色体操作。 这一术语最早是由Rick和Khush在1966年提出来的。 6.3.1 多倍体育种 多倍体是由于细胞内染色体加倍而形成的，如通过抑制受精卵第二极体的放出产生三倍体或抑制第一次卵裂产生四倍体。 6.3.1.1 多倍体育种技术方法 目前广泛应用的诱导方法有生物学、物理学和化学方法。其中物理方法主要用于多倍体育种史的初期，现已不常用；生物方法是随着组织培养技术发展起来的新技术，尚不成熟。这两种方法由于加倍的效率低而很少使用。目前最普遍采用的方法是化学试剂诱导法，其中秋水仙素则是至今发现的最有效、使用最为广泛的染色体加倍诱导剂。 生物学方法： 主要包括体利用胚乳培养、细胞杂交等。如三倍体动物可通过杂交产生。 物理学方法：温度休克法、水静压法、机械创伤、电离辐射、离心、高盐高碱法等。 化学方法： ?原理：利用一些化学物质也可以阻止第二极体的排出或受精卵的有丝分裂而产生三倍体或四倍体。 ?常用化学物质 ?细胞松驰素B（Cytochalasin）能抑制肌动蛋白聚合成微丝，从而抑制细胞质分裂。 ?秋水仙素（Colchicine）： 可以抑制细胞分裂中纺锤丝的形成，因而可以抑制有丝分裂。这种方法已在植物多倍体诱导中广泛使用。也可用秋水仙素与种间杂交技术相结合来诱导异源多倍体。 ?诱导多倍体形成的其他药物还有麻醉剂 如 N2O、CHClF2和聚乙二醇等。 ? 秋水仙素 秋水仙素则是至今发现的最有效、使用最为广泛的染色体加倍诱导剂。 是从一种百合科秋水仙属植物器官中提取的一种生物碱。 ?作用原理 能特异性地与细胞中的微管蛋白质分子结合，从而使正在分裂的细胞中的纺锤丝合成受阻，导致复制后的染色体无法向细胞两极移动，最终形成染色体加倍的核。在一定浓度范围内，秋水仙素不会对染色体结构有破坏作用，在遗传上也很少引起不利变异。处理一定时间的细胞可以在药剂去除后恢复正常分裂，形成染色体加倍的多倍体细胞。 ?处理技术 （1）处理部位：只有处理正在分裂的细胞才能获得多倍体。通常以植物茎端分生组织或发育期的幼胚为材料。 （2）处理方式：秋水仙素一般用水溶液，也可混入羊毛脂、琼脂或凡士林中。可根据不同情况选择以下处理方法：浸渍法、涂抹法、棉花球滴渍法、喷雾法、注射法、药剂培养基