寄生虫感染及病原学诊断.ppt

寄生虫感染及病原学诊断 邱 宗 文 第三军医大学附属新桥医院 寄生虫病流行及感染状况 寄生虫对人类的危害 寄生虫病的实验诊断 寄生虫感染的病原学诊断 流行状况 据估计全球受寄生虫感染人数多达45亿 蛔虫感染12.8亿、钩虫感染7.16亿、鞭虫感染8.7亿、丝虫感染2.7亿、血吸虫感染2亿、疟原虫感染4亿。 全球危害严重的六大热带病 除麻风病外，均为寄生虫病：疟疾、血吸虫病、丝虫病、利什曼病、锥虫病。 国内五大寄生虫病 疟疾（malaria ） 血吸虫病（ schistosomiasis ） 丝虫病（ filariasis ） 利什曼病（ leishmaniasis ） 钩虫病（hook worm disease） 1992-1995年全国人体寄生虫分布调查结果 共查到人体肠道寄生虫56种 平均感染率为62.632% 感染率最高的海南省为94.735% 寄生虫对人类的危害 直接危害 导致寄生虫病 多种疾病传播媒介 间接危害 寄生动物体内寄生虫导致畜牧业、水产业的经济损失 寄生虫对宿主影响 夺取营养 机械性损伤 毒素和抗原物质的作用 干扰和免疫逃避 寄生虫病实验诊断 病原学诊断（常用） 粪便检查：肠道寄生虫病 血液检查：疟疾、丝虫病、利什曼原虫 排泄分泌物检查：如痰液查肺吸虫卵 组织、器官活检：如旋毛虫病 其他检查方法 免疫学诊断（常用） 分子生物学诊断（少用） 病原学诊断 对象：寄生阶段、排出阶段 优点：简单，能确诊 缺点：检出率底 免疫学诊断 皮内反应：操作简单、阳性检出率较高、特异性较低 循环抗体检测：分为多克隆和单克隆抗体检测。前者敏感性较高，具有交叉反应；后者特异性高，敏感性低，均不能区分现症和过去感染 循环抗原检测：可作为早期诊断、活动感染、感染负荷、治疗效果等依据，但敏感性较低 粪便检查 主要用于检查蠕虫虫卵、原虫滋养体及包囊 如检查肠道内原虫滋养体，最好立即送检。盛粪便的容器要干净，不能混入尿液或其他污染物 直接涂片法 用于蠕虫卵、原虫包囊和滋养体的检查 操作：滴1滴生理盐水于洁净载玻片上，用竹签挑取绿豆大小粪便块，盐水中涂抹均匀，厚度以透过玻片约可辨认书上字迹为宜 蠕虫卵检查：一般在低倍镜下观察，如用高倍镜观察需加盖玻片，应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状和大小、卵壳大多光滑整齐、具固有色泽，卵内含卵细胞或幼虫 原虫检查：气温越接近体温，滋养体的活动愈明显，必要时可用保温台保持温度 包囊检查：以1滴碘液代替生理盐水直接涂片。若同时需检查滋养体，可在玻片另一侧滴1滴生理盐水，涂抹粪便后盖上盖玻片，片中滴碘液的一侧检查包囊，另一侧查活的滋养体 碘液配方：碘化钾4g，碘2g，蒸馏水100ml 沉淀浓聚法 原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉积于水底，有助于提高检出率，但比重小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。 自然沉降法：主要用于蠕虫卵检查，蠕虫卵比重大于水，可沉于水底，使虫卵浓集，经水洗后，视野清晰，易于镜检。 操作：取粪便20～30g，加水制成混悬液，用金属筛（40～60孔）或2～3层纱布过滤，再加水冲洗残渣，过滤的粪液在容器中静置25分钟，倒去上层液体，再加满清水，每隔15～20分钟换水一次，（共3～4次，直至上层液清晰为止。最后倒去上层液，取沉渣作涂片镜检。如检查包囊，换水时间间隔延长至约6小时。 离心沉降法 操作：将滤去粗渣的粪液离心（1500～2000rpm）1～2分钟，倒去上层液体，加上清水，如此反复3～4次，直至上层液体澄清为止，最后倒去上层液，取沉渣镜检。 漂浮浓聚法 利用比重大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面 饱和盐水浮聚法：此法检查钩虫卵效果最好，也可用于检查其他线虫卵和微小膜壳绦虫卵，不适用于吸虫卵和原虫包囊。 操作：用竹签挑取黄豆粒大小的粪便置于浮聚瓶（高3.5cm、直径约2cm的圆形直筒瓶）中，加入少量饱和盐水调匀，再漫漫加入饱和盐水至液面略高于瓶口，以不益出为止，此时在瓶口盖一盖玻片，静置15分钟，将盖玻片提起并迅速翻转，镜检 肛门拭子法 适用于肛周产卵的蛲虫或常在肛门附近发现的带绦虫卵 棉签拭子法：用盐水湿润的棉签在肛门周围擦拭后放入盛有清水的试管内，经充分浸泡，取出，在试管壁挤去水分后弃去，试管静置10分钟，或经离心后倒掉上层液体，取沉渣镜检。 透明胶纸法：用长约6cm，宽约2cm的透明胶纸有胶面粘贴肛门周围的皮肤，然后将有胶的一面平贴在玻片上，镜检。 粪便中可查件的虫卵与原虫 蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵蛲虫卵 肝吸虫卵、姜片吸虫卵、血吸虫卵 带绦虫卵、毛园线虫卵 溶组织阿米巴包囊及滋养体 结肠内阿米巴包囊及滋养体 蓝氏贾第鞭