牛奶中土霉素残留的ELISA检测.pdfVIP

第 19卷 第 1期 信阳农业高等专科学校学报 V01．19No．1 2009自： 3月 JournalofXinyangAgriculturM College Mar．20O9 牛奶中土霉素残留的ELISA检测 邢淑婕，刘开华，刘学彦 (信阳农业高等专科学校 生物技术系河南 信阳464000) 摘 要：问接竞争ELLS法分析了自制抗土霉素抗体的灵敏度与特异性。结果表明，所得抗体的灵敏度和特异性 都较好，和其它结构棚似或相近物质的交叉反应率较低。以自制抗体建 的间接竞争 ELISA法对牛奶中土褥素 的残 鳋进行了检测 ，所建立的问接竞争 ELISA方法对_七霉素的检测范围为5—200ng-mL～，栩关系数 r= 0．9951。 关键词：牛奶；土霉素；抗体；ELISA 中图分类号：TS207．5 文献标识码 ：A 文章编号：1008-4916(2009)O1-0127-03 AnalysisofOxytetracyclineinlllill【bvELISA XINGShu—jie，LIUKai—hua，LIUXue—yan (Dept．ofBiotechnology，XinyangAgriculturalCollege，Xinyang464OOO，China) Abstract：ThesensitivitiesandspeeificitiesoftheantibodywereanalyzedusingindirectcompetitiveELISA．Theresults revealedthathteantibodieshavegoodsensitivitiesandspeeifieitiesandlow ratioofeltOs8reactivitleswiht ohterstructure similarantibiotics．Onhtebasisofhtese，theindirectcompetitiveELISA wasusedtoanalyzehteOxytetracyelinecontent inmilk．Th eresultsshowedhtathtedetectingrangewas5～200ng ·mL～． Keywords：Oxytetraeycline；natibody；ELISA 在兽医临床上，土霉素(Oxytetracyeline，OTC)被 公司；其它试剂均为分析纯。 广泛应用于治疗奶牛乳房炎，因此，牛奶中极易残留 1．2 主要仪器 OTC。长期饮用含有抗生素的牛奶会对消费者的身 MK3型酶标仪：上海雷勃分析仪器有限公司；台 体健康造成很大的损 ¨。世界卫生组织、欧盟及 式高速离心机(TGL．16G)：北京医用离,C,Ol厂 我国政府对牛奶 中OTC的残留都做出了严格的规 1．3 方法 定，其残留量不得高于 100lag·L I2j。目前，采用 1．3．1 间接竞争ELISA测抗体的特异性 J 免疫学方法对牛奶 中的OTC进行检测正 日益受到研 (1)抗原包被 ：用0．1otol·L—pH9．5的碳酸盐 究人员的关注。邢淑婕等副‘研究了有关土霉素抗原 缓冲溶液稀释 OTC—OV至 lO ·mL～，每孑L 的构建及其抗体的制备，本文对抗土霉素抗体的性质 100；rL包被40孔微孔板，4~C过夜 ，恢复至室温，倾 做了进一步研究，并运用该抗体以ELISA分析法检 去包被液，PBST(0．05％Tween20pH7．2 0．1otol· 测牛奶中土霉素的含量。 L 磷酸缓冲溶液生理盐水)满孔洗涤三次，每次5 min，扣干。 1 材料与方法 (2)封阻：每孔200 L5