牛粪中兼性厌氧纤维素降解菌的分离及酶活测定.pdfVIP

农 林 论 坛 牛粪中兼性厌氧纤维素降解菌的分离及 酶活测定 1 2 1 2 樊 川 杨旭升 张 欣 郭春景 （1、黑龙江省科学院生物肥料研究中心，黑龙江 哈尔滨 150086 2、黑龙江省科学院，黑龙江 哈尔滨 150001） 摘 要： 从黑龙江省大庆地区的新鲜牛粪中分离出降解纤维素最快的一种复合菌系，对该复合菌系特性的研究表明：当温度为42.5℃，PH 值为 7.2 ，接种量为20%，B 号培养基中培养100h 时的滤纸降解率达到75%±3%。 关键词：牛粪；纤维素降解菌；培养基；分离 利用微生物产生的纤维素酶降解纤维素， 以 1.5ml1.0% （W/V） CMC 溶液为底物 活性。 具有纤维素分解效率高、无二次污染等特点， （用PH7.0 的0.2mol/L Na HPO ~0.1mol/L 柠檬 2.2 讨论 2 4 以往的报道中，研究较多的纤维素降解菌是好 酸缓冲液配制）加0.5ml 稀释酶液，于50℃保 本文中的样品来自反刍动物奶牛的粪便， 氧真菌，对厌氧和兼性厌氧纤维素降解菌研究 温30min，然后加入1.0ml DNS 试剂，沸水浴 利用厌氧滚管法从中筛选分离出的生命力旺 的较少，而二者在乙醇生产、饲料发酵等方面 煮 5min ，然后一起放入凉水至室温，在 盛、产纤维素酶活性高的复合菌系，可见在奶 [1，2] 的应用相对于好氧菌更具优势 。存在于反 540nm 紫外线光密度仪（O.D.）测定，以相应 牛等反刍动物的消化系统中存在着较丰富的微 刍动物粪便中的纤维素降解菌虽然具有一定的 空白样调零。酶活力单位定义为：在测定条件 生物资源，这类微生物资源一般具有对人畜无 纤维素降解活力，但因其培养条件苛刻而研究 下，分解1%CMC-Na 溶液每小时产生 1mg 葡 害、生物转化效率高、作用条件温和等特点， 较少。本研究从奶牛的牛粪中分离出一种复合 萄糖为1 个纤维素酶活力单位。 因而具有很大的应用潜力，尤其在环境保护， 菌系，对其进行了分析，并初步研究了该菌系 2 结果与讨论 厌氧发酵等方面更是具有广阔的应用前景。 [3] 参考文献 的纤维素降解特征 ，为进一步的研究和应用 2.1 结果 奠定了基础。 通过厌氧滚管法分离到了厌氧菌降解纤维 [1] 中山大学生物系生化微生物教研室.生化技 1 材料与方法 素的复合菌系，将该复合菌系分别接种于A、 术导论[M].北京：人民教育出版社，1979.61. 1.1 材料来源：试验分离所用的奶牛粪便 B、C 三种不同的培养基中进行培养，进行改 [2] 赵小蓉，林启美等.纤维素分解菌对不同纤 样品来自黑龙江省大庆地区的寒地草场、奶牛 复合菌系的产纤维素酶试验，对厌氧滚管内的 维类物质的分解作用 [ J] . 微生物学杂志， 养殖农场和奶牛养殖个体户的新鲜牛粪。 纤维素降解复合菌系培养液进行了酶活测定， 2000.20 （3）：12-14. 1.2 培养基