生物大分子的共振光散射光谱.pdfVIP

第 2 1 卷, 第 4 期 光　谱　实　验　室 V o l. 2 1 , N o . 4 2 0 0 4 年 7 月 Ch inese J ou rna l of S p ectroscop y L abora tory Ju ly , 2 0 0 4 生物大分子的共振光散射光谱① ② 杜 晓 燕 　郑 晶 ( 哈尔滨医科大学公共卫生学院　哈尔滨市大直街 199 号　15000 1) 摘　　要 　　共振光散射技术是一项在普通荧光分光光度计上可实现分析领域中应用的新技术。本文阐述了共振 光散射的基本原理, 分类介绍了在生物大分子研究和测定方面的应用, 分析了共振散射体系的新发展。 关 键 词　共振光散射, 生物大分子, 共振散射体系。 ( ) 中图分类号: O 433. 4　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 2004 04082 105 1　引言 光散射是指一束光线通过介质时在入射光以外的方向上观察的光现象, 它是电磁辐射与物质 相互作用的一种表现形式。光散射技术在物理化学、胶体化学、高分子化学研究中具有十分重要的 地位。由于传统的光散射技术不能满足定量分析在准确度和精密度方面的要求, 未能在分析化学中 [ 1 ] 推广应用。1993 年 P a sternack 等 用特殊的共振光散射技术研究了卟啉类化合物在核酸上的聚 集, 从而首次将该技术与化学过程联系起来。黄承志等[2, 3 ] 利用这种技术研究了生物大分子体系的 散射光谱, 建立了共振光散射技术定量测定生物大分子的新的高灵敏度分析方法。目前这种技术被 [2—5 ] [ 6, 7 ] [ 8 ] [9 ] 广泛应用于核酸 、蛋白质 、肝素 、多糖 等生物大分子的研究和测定。本文探讨了共振光 散射形成的原理, 总结了应用于生物大分子测定的共振光散射体系。 2　光散射和共振光散射 光散射现象广泛存在于光与粒子的作用过程中。当光照射到分散体系时, 他们之间有 3 种作用 方式: 光吸收、光反射和光散射。当粒子的尺寸大于入射光波长时发生光反射; 当粒子的尺寸小于入 射光波长时, 发生光散射。光散射与体系的不均匀性有关。实际上除了真空之外, 所有介质都有一 定程度的不均匀性。尺寸与波长数量级相近的微粒之间在光学性质上会有较大差异, 在光波作用下 将成为强度差别较大的次波源, 次波源相干叠加的结果使除了按几何光学规律传播的光线外, 在其 他方向也有光线存在, 这就是散射光。当散射粒子大小(d ) 与入射光波长(ex ) 之间满足d ≤20ex 时, 散射光强度与入射光波长的4 次方成反比。分子在吸收能量较低的光子之后, 不足以使分 ( ) ( ) ① 基金项 目: 黑龙江省科学技术计划项 目 攻关 基金资助 20020 10 1 ( ) ( ) ( ) ② 联系人, 电话: 045 1 5364 1230; 045 1 宅 ; : @ . E m ail x iaoyanharb in ho tm ail com ( ) 作者简介: 杜晓燕 1954— , 女, 北京市人, 哈尔滨医科大学公共卫生学院教授。曾赴 日本东京大学和东北大学做访问学者。主要研 究生物传感器和生物检测技术。 收稿 日期: 822