第二篇基因重组.pptVIP

第二章 基因重组 三、准性生殖和有性生殖的异同点 二、致育因子和细菌杂交 关于感受态出现的假说： K12菌株溶源细菌裂解液感染不同的缺陷的大肠杆菌，涂选择平板（-）gal。 gal-大肠杆菌形成浅色菌苔 加裂解液 1．局限转导的发现和证实 A B C a b c A B C a b c A B C a b c A B C a b c A B C a b c A B C a b c A B C A b c a B C a b c 体细胞交换模式图 (A) (B) (A)不发生交换 (B)发生交换 A B C a b c E D F e d f G H T g h t E D F e d f G H T g h t A B C a b c A B C a b c E D F e d f G H T G H T g h t A B C a b c E D F e d f g h t 染色体的不分离行为 2．异核体可以作为细胞质基因测定的工具。 四、研究异核体的意义 1．异核体在遗传分析中可以用来测定等位基因和非等位基因； 第四节 细菌的接合作用 一、 细菌基因重组的发现和证实 （一）细菌基因重组的发现 （二）细菌基因重组的证实 标记： 以基因发生突变的特点来标记某菌株的性质，这种突变的基因就称为该菌株的标记（简单的说突变的基因表型就是标记）。 完全培养基 A- B+ lac- ST T1S A+ B- lac+SS T1T 2×106 106 106 2×106 基本培养基 大肠杆菌k-12菌株的基因重组 1.排除遗传物质的渗入 非选择标记： 在某种培养条件下，可能起到排除亲本的某些基因标记。 杂交个体单倍体的证实： 2.排除细胞的互养 3.排除回复突变 菌株A 菌株B 通过滤器 图 一种U型管，一臂放菌株A,一臂放菌株B，中间由滤器隔开，未发现有原养型细胞出现 F因子的基 因结构如下： （一）F因子： 第一区段：控制自主复制的区段 第二区段：控制细菌间传递作用的区段 第三区段：重组区段 rep inc oriV rep oriT finP 复制 自主复制 fex IS3 rδ IS2 IS3 插入与切除 重组区段 Z I D T S G H O F N U C W V 转移操纵子 传递 大肠杆菌F质粒的基因图 点样法 （—） （—）+A (—）+B (—）+A+B 依次点种 ① ② ③ ④ 一. 四种都不长 A+B+ 二. 1.3不长，2.4长 A-B+ 三. 1.2不长，3.4长， A+B- 四. 1.2.3不长，4长 A-B- A-B+ A+B- 第一区段：控制自主复制的区段 第二区段：控制细菌间传递作用的区段 第三区段：重组区段 rep inc oriV rep oriT finP 复制 自主复制 fex IS3 rδ IS2 IS3 插入与切除 重组区段 Z I D T S G H O F N U C W V 转移操纵子 传递 大肠杆菌F质粒的基因图 (二)三种状态的 E.coli 细菌之间的关系 1、F+和F-能杂交，Hfr和F-也能杂交，F-和F-则不能杂交，说 明F-不同于F+与Hrf，F+与Hfr有相同的地方； 2、从F+细胞群中可以得到Hfr菌株，从Hfr菌株中也可以得到 F+的菌株，而从F-中则不可能得到Hfr和F+菌株，说明F+与 Hrf都含有F因子，而F-没有； 3、F+和F-杂交后，后代转变为F+，在杂交过程中出现的重组 频率大约只有10-6；而Hfr与 F-和F-杂交后，后代仍然是F-， 但重组频率都高于上种好多倍。这说明F+与Hrf虽然都能 导致基因重组，但它们是有区别的； 4、F+细胞经吖啶类药物处理后转变成F-（这种药物浓度很低， 不致于抑制细菌生长）；而Hfr细胞经同样处理后性质仍然 不变。这说明F+与Hrf虽都含有F因子，但它们在细胞中存 在的状态不一样。 (三) 大肠杆菌杂交的几种可能 1.F+×F-杂交 2.Hfr×F-杂交 3.F’×F-杂交 利用Hfr×F-的二个菌株结合，在连续间断的不同时间内取样，放在中断器内，以人为机械的方法，中断Hfr×F-的接合，分别将接合子涂在一系列不同的选择培养基上，通过在不同的选择培养基上在不同时间内出现的重组子，可以将某一基因的位置确定下来。这一方法称为中断杂交