降纤酶质量研究.PDF

中国药师　　２０１５年第１８卷第１０期　　ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｉｓｔ２０１５，Ｖｏｌ．１８　Ｎｏ．１０ 降纤酶质量研究 李炎　林涛　王叔桥　陈齐英　马晶　秦力　陈婕　袁军　（四川省食品药品检验检测院　成都６１００９７） 摘　要　目的：考察降纤酶的质量现状及存在问题。方法：对国家食品药品监督管理总局（ＣＦＤＡ）网站数据库上检索到的有 降纤酶生产批文的生产企业进行问卷调查，对部分生产企业进行现场调研，针对上述两个环节中发现的问题，对降纤酶原液、 中间体、半成品、成品开展了降纤酶原料（液）蛋白质序列分析等一系列实验室探索性研究，提升其安全性、有效性、稳定性和 可控性。结果：目前市场上流通的大部分样品的纯度均较低，其中尖吻蝮蛇降纤酶的主要成分为蕲蛇酶，白眉蝮蛇降纤酶的 主要成分为ＮＣＢＩ蛋白数据库中编号为ｇｉ｜１４３６８１９１９｜（ｓｐ｜Ｐ８５１０９．１｜）的蛋白；降纤酶效价测定影响因素中Ｔｒｉｓ的浓度影响最 大；加入大分子保护剂可以改善样品中的辅料右旋糖酐对效价测定结果的影响。效价测定中两种仪器法（磁珠法和光学法） 测定的结果差距较大，均比目测法低，目前尚不适用于降纤酶效价的测定。热稳定性表明注射用降纤酶热稳定性较好，降纤 酶注射液的热稳定性较差。本研究采用浓缩一倍的Ｔｒｉｓ缓冲液稀释纤原，并加入适当的保护剂，建立了降纤酶半成品效价测 定的方法。结论：目前降纤酶的质量有待提高。两种蛇毒来源的降纤酶结构、纯度等差别较大，现行的标准项目设置不全面； 缺少专属性较强目前的鉴别；异常毒性、效价测定可操作性差等，不能有效地控制降纤酶的质量。有必要将尖吻蝮蛇和白眉 蝮蛇来源的降纤酶作为两个品种管理，同时加强降纤酶的标准化研究。 关键词　尖吻蝮蛇降纤酶；白眉蝮蛇降纤酶；质量研究 ＋ 中图分类号：ＴＱ４６０．７２　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００８０４９Ｘ（２０１５）１０１６９５０６ ＱｕａｌｉｔｙＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＤｅｆｉｂｒａｓｅ ＬｉＹａｎ，ＬｉｎＴａｏ，ＷａｎｇＳｈｕｑｉａｏ，ＣｈｅｎＱｉｙｉｎｇ，ＭａＪｉｎｇ，ＱｉｎＬｉ，ＣｈｅｎＪｉｅ，ＹｕａｎＪｕｎ（ＳｉｃｈｕａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ， Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００９７，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｒｅｓｅａｒｃｈｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｌｅｖｅｌａｎｄｐｒｏｂｌｅｍｓｏｆｄｏｍｅｓｔｉｃｄｅｆｉｂｒａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅｓｕｒｖｅｙｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄｉｎｔｈｅｆａｃｔｏｒｉｅｓｗｉｔｈｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｐｐｒｏｖａｌｏｎｔｈｅｗｅｂｓｉｔｅｄａｔａｂａｓｅｏｆＣＦＤＡ，ａｎｄａｓｉｔｅｓｕｒｖｅｙｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｉｎｓｏｍｅｏｆ ｔｈｅｆａｃｔｏｒｉｅｓ．Ｆｏｒｔｈｅｐｒｏｂｌｅｍｓｆｏｕｎｄｏｕｔｉｎｔｈｅｔｗｏｓｕｒｖｅｙｓ，ａｓｅｒｉｅｓｏｆｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙｌａｂｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｏｒｄｉｎａｒｙａｎａｌｙｓｉｓｓｕｃｈａｓ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎｔｈｅｍａｔｅｒｉａｌｓ，ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ，ｓｅｍｉｆｉｎｉｓｈｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓａｎｄｆｉｎａｌｐｒｏｄｕｃｔｓｉｎｏｒｄｅｒｔｏｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅｉｒｓａｆｅｔｙ，ｖａｌｉｄｉｔｙ，ｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｌａｂｉｌｉｔｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｐｕｒｉｔｙｏｆｔｈｅｍｏｓｔｏｆｔｈｅｍａｒｋｅｔｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｗａｓｌｏｗ．Ａｃｕｔｏｂｉｎｗａｓｔｈｅ ｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｉｎｄｅｆｉｂｒａｓｅｆｒｏｍＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ，ａｎｄｔｈｅｍａｊｏｒｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｉｎｄｅｆｉｂｒａｓｅｆｒｏｍＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｈａｌｙｓｕｓｓｕｒｉｅｎｓｉｓｗａｓ ａｎｕｎｋｎｏｗｎｐｒｏｔｅｉｎ，ｗｈｉｃｈｗａｓｎｕｍｂｅｒｅｄｂｙｇｉ｜１４３６８１９１９｜（ｓｐ｜Ｐ８５１０９．１｜）ｉｎＮＣＢＩｐｒｏｔｅｉｎｄａｔａｂａｓｅ．Ｔｒｉｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓ ｔｈｅｍａｉｎｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒｉｎｔｈｅｔｅｓｔｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｏｔｅｎｃｙ．Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｃｏｕｌｄｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｄｅｘｔｒａｎ．Ａｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｔｅｓｔｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｏｔｅｎｃｙｏｆｄｅｆｉｂｒａｓｅｓｅｍｉｐｒｏｄｕｃｔｓｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄｂｙｄｉｌｕｔｉｎｇｔｈｅｆｉｂｅｒｗｉｔｈｄｏｕｂ