MIR-187影响胃癌细胞恶性生物学行为的研究.pdf

第 17卷 第 3 期 2017年 1月 科 学 技 术 与 工 程 Vol . 17 No . 3 Jan . 2017 1671 — 1815(2017)03-0175-04 Science Technology and Engineering © 2017 Sci . Tech . Engrg . MIR -187影响胃癌细胞恶性生物学行为的研究 王红红 1 张永国2 田季雨1 张 军 1 殷玉华 1 刘 敏 1 (解放军 518医院内科1 ,西 安 710043 ;沈阳军区总医院消化内科2,沈 阳 110016) 摘 要 探讨 mir -187对胃癌细胞恶性生物学行为的影响；采用qPCR检测 miR -187在胃癌SGC7901细胞、MKN45细胞和人 永生化胃黏膜上皮细胞GES细胞中的表达，应用miR -187 mimics转染 SGC7901细胞和MKN45细胞，通过 MTT实验、流式细 胞术和裸鼠成瘤实验检测miR -187对胃癌细胞增殖、凋亡的影响。结 果 SGC7901、MKN45细胞中 miR -187的表达明显高于 GES细胞；与对照细胞相比，MTT实验显示转染miR -187 mimics后胃癌 SGC7901细胞的增殖增快（ P 0. 05 ) ，流式细胞检测 表明 miR -187mimicS 转染可以减少 SGC7901细胞的凋亡（ P 0.05)，裸鼠成瘤实验提示转染 miR -187mimicS 可以促进 SGC7901细胞成瘤（P 0.05)。说明 miR -187可以促进胃癌细胞生长、抑制凋亡和促进增殖，提示miR -187在胃癌恶性生物 学行为中发挥重要作用，有可能成为诊断胃癌的新标志和治疗胃癌的新靶点。 关 键 词 imR -187 胃癌 生长 凋亡 增殖 中图法分类号R735.2; 文献标志码 B 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死 人胃癌细胞系SGC7901细胞、MKN45细胞、永 亡率呈逐年上升的趋势[1]。近年来，随着医学研究 生化胃黏膜上皮细胞GES购自上海细胞中心，cy3 的不断发展，胃癌的诊断和治疗手段也不断完善，但 标i 己白勺 miR -187 mimics 及 miRNA control mimics 由 胃癌的死亡率仍居高不下，其在世界范围内位于恶 广州市锐博生物科技有限公司提供（miR -187 mim ­ 性肿瘤的第二位[2]。因此，寻找新的胃癌诊断标志 ics 序歹[] 为 aggcuacaacacaggacccggg ; miRNA control 物和新的胃癌治疗IE 点具有非常重要的意义。 mimics 序列为 caucaaagcggugg gaugug ),小牛血清、 微小 RNA (microRNA )是一类非编码的单链小 DMSO 、RPIM1640、脂质体2000、RNA 提取试剂盒、 分子 RNA ,广泛存在于生物体内。miRNA 通过与靶 Cy 5. 5/ FITC 试剂盒均购自Invitrogen公司,6孔、24 miRNA结合可导致miRNA 降解或翻译抑制，在转 孔、96孔细胞培养板购自Coming公司。 录后水平负性调节靶基因的表达[3]，在机体众多生 1. 2 细胞培养 物学功能中发挥重要的作用，因此成为近年来研究 胃黏膜上皮细胞GES 、胃癌SGC7901、MKN45 的热点。研究发现，miR -187参与细胞生长、增殖、 细胞在含1〇 % 小牛血清的RPIM1640培养液中贴 凋亡等生物学进程，在乳腺癌、结肠癌、乱肠癌等多 壁生长，置于37 °C孵箱常规培养,2 ~3 d 胰酶消化 种肿瘤的增殖、转移等过程中发挥重要作用 [4]。我