_淀粉样肽激活小胶质细胞分泌的研究.pdfVIP

中国热带医学2010 年第10 卷第1 期 CHINA TROPICAL MEDICINE Vol . 10 No .1 January 2010 79 ［实验研究］ β- 淀粉样肽激活小胶质细胞分泌TNFα 的研究 1 2 3 1 1 谢春英 ，胡冬 ，朱美玲 ，孙顺昌 ，刘香萍 摘要：目的 研究β-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞分泌TNFα 的合适方案。 方法 分离纯化小胶质细胞，再以 不同浓度可溶性β-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞，应用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞生存率，光学显微镜下观察不 同时间点的细胞形态，同时以酶联免疫吸附法检测不同时间点小胶质细胞分泌TNFα 的含量。 结果 细胞生存率试 验结果显示β-淀粉样肽对小胶质细胞无明显的毒性作用。在浓度分别为0.1 、1.0、10、50、100μmol/L 时，β-淀粉样肽均 可诱导激活小胶质细胞分泌TNFα ，TNFα 分泌量随 β-淀粉样肽的浓度增加而升高，但在 β- 淀粉样肽浓度高于 10μmol/L 后TNFα 分泌量的增加并不显著。β-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞2h 后开始分泌TNFα ，24h 达到高峰，此后 逐渐下降。 结论 β-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞具有浓度及时间依赖性，以10μmol/Lβ-淀粉样肽诱导激活小胶质 细胞24h 是合适的激活方案。 关键词：β 淀粉样肽；小胶质细胞；TNFα ；激活方案 中图分类号：R749.1 文献标识码：A 文章编号：1009-9727 （2010）1-79-03 Protocal exploration of TNFα secretion of microglia induced by amyloid β-peptide. XIE Chun-ying ，HU Dong， ZHU Mei-ling ，et al. （1.Department of Clinical Laboratory ，Peoples Hospital of Baoan ，Shenzhen 518101 Guangdong ，P. R. China; 2.Department of Clinical Laboratory ，Mianyang Central Hospital ，Mianyang 621000 Sichuan ，P. R. China; 3.Baoan Hospital of Traditional Chinese Medicine ，Shenzhen 518101 Guangdong ，P. R. China） Abstract: Objective To explore the induction of TNFα secretion by microglia with amyloid β-peptide. Methods Primary mouse microglia was purified and cultured. Microglia was activated with a series of doses of amyloid β-peptide. Cell survival rate was determined by MTT assay. Morphology of microglia induced by amyloid β -peptide was observed with microscope. Concentration of TNFα secreted by microglia was measured by ELISA. Results Amyloid