实验5植物呼吸速率的测定(小笼框法).docVIP

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实验5植物呼吸速率的测定(小笼框法)

实验4 植物呼吸速率的测定(小笼框法) 一、目的 学会用小笼框法测定植物的呼吸速率。 二、材料用具及仪器药品 (1) 0.05mol/L Ba(OH)2溶液——称取15.76g纯Ba(OH)2·8H2O溶于冷开水稀释至1000ml即成。 (2) 0.05mol/L (COOH)2滴定液——称取(COOH)2·2H20 6.3025 克溶于蒸馏水中,稀释至1000ml即成。 2.2*为1ml 0.05mol/L 草酸相当于CO2的毫克数,该数字可以从下列反应式推算出来 Ba(OH)2+CO2→BaCO3↓+H2O 从上面反应式可知:作用于1摩尔的Ba(OH)2要用去的 g的CO2。 若1000ml 0.5mol/L Ba(OH)2相当于22gCO2,那么1000ml 0.05mol/L Ba(OH)2就相当于2.2g CO2。因此,1ml 0.05mol/L Ba(OH)2则相当于2.2mgCO2,因此1ml 0.05mol/L (COOH)2相当于2.2mg CO2。 (3)广口瓶、橡皮塞子、恒温箱、镊子、小笼框、酸滴定管、碱定管、漏斗。 (4)1%酚酞。 三、原理 在一密封的容器里,其空气中原来CO2之含量。用Ba(OH)2溶液将其吸收,然后用草酸进行滴定,即可计算出来。 Ba(OH)2+CO2→BaCO3+H2O 若将待测定种子装入在该密封的容器里,由于进行呼吸作用放出的CO2为Ba(OH)2溶液所吸收(从溶液中产生白色BaCO3沉淀可以看出)。然后用草酸进行滴定。 根据两次(实验和空白)滴定用去草酸量之差数,即可计算出在测定时间内呼吸作用所吸收CO2的量。从而计算出所测种子的呼吸速率。 四、方法 取干净的300ml广口瓶两个,并准备四个橡皮塞子如下:橡皮塞子(1)二个(公用,两孔,一孔倒插一端拉成毛细管状的玻璃管。另一孔插入玻璃棒)。橡皮塞子(2)二个(无孔,塞底钉入大头针,弯曲)。此时,还准备两个铁钞小笼框。 实验开始前,打开广口瓶瓶塞,顺瓶口方向摇瓶子多次,使瓶内空气与室内空气一致。 分别在一个小笼框内装入待测的材料(萌发的或没有萌发的水稻种子等),装入量以不高于小笼框高度易于流通气体为宜(萌发的水稻或小麦种子可装入100粒)。装好后把小笼框挂在橡皮塞子(2)的大头针上。 实验开始时,以橡皮塞子(1)紧塞广口瓶口,拨去塞子上的玻璃棒,立即用大姆指堵住孔口,迅速插入滴定管,滴入20ml 0.05mol/L Ba(OH)2溶液,然后拨出橡皮塞子(1),把挂有待测材料的橡皮塞子(2)迅速塞紧。同样,在另一广口瓶加入同量的0.05mol/L Ba(OH)2溶液,只是小笼框中不放实验材料,作空白实验用。 一切装置好后,立即把两瓶移放入30℃的恒温箱内(如作不同温度条件对呼吸速率影响比较试验:可将待测材料放于20℃以下,25℃以上等不同温度条件中),准确记录时间,不时摇动广口瓶(不能用力太锰, 以免小笼框掉下或碱液沾到小笼框上)。 经30分钟后,将广口瓶子取出,拔去塞子和小笼框,迅速换上橡皮塞子(1),塞紧瓶口。 如供测定的材料为萌发种子,可不必烘干,只计算其鲜重,否则应将材料烘干,称其干重。 在进行滴定之前,拔去塞子上的玻璃,迅速加入1%酚酞4滴,并插入滴定管,用0.05mol/L草酸进行滴定,记下滴定时两瓶用去草酸的量,然后计算供测定材料的呼吸速率。公式如下: 呼吸速率(mgCO2·g-1FW·h-1= [空白滴定用草酸量(毫升)—呼吸滴定用草酸量(毫升)]×2.2* 供测材料克鲜重(或克干重)× 呼吸时间(h) 五、实验结果 计算所测材料的呼吸速率。 六、思考题 1、实验期间,为什么要不时地摇动广口瓶? 2、本实验为什么要塞紧广口瓶的盖子?

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