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肺癌中血管内皮生长因子的表达及其与血管密度的关系 作者：盛辉 苑春莉 王医术 张丽红 王心蕊 作者单位：吉林大学第一医院，吉林 长春 130021 　　【摘要】 目的 研究各种类型肺癌中血管内皮生长因子（VEGF）的表达和病灶局部微血管密度(MVD)。 方法 应用免疫组化法对非小细胞肺癌、小细胞肺癌及其癌旁组织和正常肺组织进行VEGF和MVD(Ⅷ因子)的检测。结果 VEGF在鳞癌、腺癌、小细胞癌和癌旁肺组织中均有不同程度的表达，VEGF在中、低分化程度肺癌中的表达程度高于高分化肺癌，在伴有淋巴结转移的肺癌组织中的表达较强。不同分化程度的肺癌组织中MVD呈上升趋势，分化程度低，血管密度高；伴有淋巴结转移，血管密度高。VEGF表达强度与肺癌的MVD值密切相关，随VEGF表达强度增高，MVD值亦显著增高。结论 VEGF在不同类型肺癌中有表达，与MVD和肺癌的发生、发展、转移关系密切，可作为肺癌的预后指标。 　　【关键词】 肺癌　血管内皮生长因子　微血管密度　免疫组化 　　血管内皮生长因子(VEGF)是一种对血管生长有强力诱导作用，特异性作用于血管内皮的生长因子，在肿瘤血管生成中有重要作用。本研究的目的是揭示VEGF在肺癌中的分布及其与微血管密度（MVD）的关系，为针对肺癌血管新生的治疗奠定基础〔1〕。 　　1 资料与方法 　　1.1 对象 　　选择2001年9月～2003年12月在吉林大学第一医院和吉林省肿瘤医院因（原发性）肺癌住院行手术切除病人共90例，患者年龄41～78岁，平均年龄（61.5±12.3）岁，术后病理证实其中非小细胞肺癌（NSCLC）82例，包括鳞状上皮细胞癌48例，腺癌34例；小细胞肺癌（SCLC）8例。同时取其中40例的癌旁组织标本和10例正常肺组织标本作为对照。所有标本经福尔马林固定，常规石蜡包埋制成蜡块保存备用。 　　1.2 免疫组化方法 　　抗VEGF抗体，抗Ⅷ因子抗体，SP超敏法试剂盒，DAB显色试剂盒，购自福建迈新试剂公司。采用免疫组化常规方法进行染色。 　　1.3 结果判定 　　VEGF和Ⅷ因子染色的判定是以细胞膜和细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性。VEGF染色先在低倍视野内(100×)找到观察部位，然后在高倍视野内(400×)每张玻片选取5个视野，每个视野观察1 000个细胞，染色阳性细胞数＜20%为，20%～50%为+，50%～70%为，＞70%为。MVD系由Ⅷ因子染色计数每高倍视野下血管环的条数，所有的单个细胞或细胞团，只要与周围组织分离清楚，不管有没有管腔形成，都认为是1个可计数的微血管。所有计量数据均由2名病理医生采用双盲法(独立检测)进行检测。 　　1.4 统计学方法 　　应用Χ2检验和t检验。 　　2 结 果 　　2.1 肺癌中VEGF和Ⅷ因子的免疫组化染色结果 　　组织中VEGF表达阳性为棕黄色颗粒，分布于细胞浆，呈弥漫性分布，偶见周围结缔组织及血管内皮细胞呈阳性染色。VEGF在鳞癌、腺癌、小细胞癌、癌旁肺组织和正常肺组织中均有不同程度的表达。VEGF在腺癌中的表达最强，在鳞癌、小细胞癌和癌周肺组织中的表达较弱，在正常肺组织中的表达最弱。Ⅷ因子染色局限于血管内皮细胞细胞膜，形成血管纵切面条形、横切面环形的棕色染色带。结果90例患者中平均MVD为24.48±9.49个/高倍视野，最高达54个/高倍视野。见表1。表1 VEGF在肺癌和癌旁组织中的表达（略） 　　2.2 VEGF和Ⅷ因子在不同分化程度、有无淋巴结转移肺癌组织中的表达 　　见表2。VEGF在中、低分化程度肺癌中的表达程度高于高分化肺癌。VEGF的表达程度在伴有淋巴结转移的肺癌组织中的表达较强。不同分化程度的肺癌组织中MVD呈上升趋势，分化程度低，血管密度高。伴有淋巴结转移，血管密度高。表2 VEGF在不同临床特征肺癌组织中的表达（略） 　　2.3 VEGF表达与MVD的相关性 　　肺癌患者组织标本MVD的均值为24.48个/高倍视野，以此均值为划分界限，以MVD＜24.48个/高倍视野为低MVD组，以MVD≥24.48个/高倍视野为高MVD组。VEGF的表达程度以-～+为低表达，以～为高表达，进行Χ2检验，发现VEGF表达程度与MVD正相关（见表3）。表3 VEGF表达与MVD的相关性（略） 　　3 讨 论 　　肿瘤的生长和转移依赖于血管新生，血管新生是一个复杂的过程，涉及内皮细胞分裂，血管基底膜及血管周围基质选择性降解和内皮细胞趋化移动等步骤。在众多的血管生成因子中，VEGF是最强的血管生成因子〔