增量表达抗病毒蛋白Bmlipase1家蚕转基因系统建立论文.pdfVIP

两南大学硕+学位论文 EGFP 1．A440、以及pSLfal180f挪piggyBac[3xp3afm]等多个基础载体，成功构建了增量表达 1 Bmlipase-l的转基因表达载体pBac[IEP—lipase-sv40-3 ．sv40．3xP3．EGFPafm]。转基因载体通过酶切进行检测，并经测序确认正确。 3．转基因阳性个体的获得及分子检测 利用构建的转基因载体，选择滞育性蚕品种大造作为受体材料，进行转基因注射，筛选 转基因系统。 因系统的差距不大，在4龄起之后的表达量明显提高。 4．转基因阳性株系的病毒抗性检测 因系进行了攻毒检测。经ID50测试后设立2个病毒攻击浓度2．66x104和3．46x104。 基因组l相较同浓度对照组l的抗病毒效果显著，死亡率降低20％左右，而浓度为3．46xlo 转基因组2的也有一定抗病效果，死亡率降低了15％左右。攻毒后5至8天的曲线图上显示 转基因组与同浓度对照组相比，死亡时间延后。通过对攻毒后24小时以内的材料进行定量PCR 达产生了比较明显的抗病效果，从而在总体水平上使得转基因品系的死亡速度延缓。而因为 继发感染等各种原因，导致后期蚕只大量死亡以