西华师范大学微生物学课件3宋波老师.ppt

第八章 微生物的遗传与变异;第一节 遗传的物质基础及其特性 第二节 微生物的遗传物质 第三节 细菌的基因转移和重组 第四节 微生物的诱变育种和遗传工程; 一、遗传物质的鉴定 二、基因组DNA和染色体 三、染色体以外的遗传因子;一、遗传物质的鉴定;光滑型（S）;活的S菌;ＳⅢ〖杀死〗 ;大量R菌落;噬菌体感染实验;A. D. Hershey和M. Chase， 1952年;沉淀中含 25%放射性; 植物病毒蛋白质和RNA可以人为地分开, 同时又可把它们重新组合成具感染性的病毒. ;TMV;结论;朊病毒的发现和思考;亚病毒的一种：具有传染性的蛋白质致病因子，迄今为止尚为 发现该蛋白内含有核酸。;人的库鲁病(kuru)、克雅氏病(Creutzfeldt Jakob disease, CJD)等;引起人与动物的致死性中枢神经系统疾病;染色体;DNA就是脱氧核糖核酸（长链）;基因控制Pr因而控制性状;基因是什么？;基因组（genome）：一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称;真核生物和原核生物的遗传物质;细胞质基因 2um质粒 F因子 R因子 Col质粒 毒性质粒 降解性质粒;与组蛋白相结合;染色体为双链环状的DNA分子（单倍体）；;性质：质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的 存在方式：游离态或附加体 重组：质粒转移时，它可以单独转移，也可以携带着染色体（片段）一起进行转移，所以它可成为基因工程的载体。 功能：进行细胞间接合并带有一些基因，如产生毒素、抗药性、降解功能等。;在某些特殊条件下，质粒有时能赋予宿主细胞以特殊的机能，从而使宿主得到生长优势。;质粒所编码 的功能和赋 予宿主的表 型效应;1、致育因子(Fertility factor，F因子);2、抗性因子（Resistance factor，R因子）;R100质粒(89kb)可使宿主对 下列药物及重金属具有抗性： 汞（mercuric ion ，mer） 四环素（tetracycline，tet ） 链霉素(Streptomycin, Str)、 磺胺(Sulfonamide, Su)、 氯霉素(Chlorampenicol, Cm) 夫西地酸（fusidic acid，fus） 并且负责这些抗性的基因是 成簇地存在于抗性质粒上。;3、Col的质粒（Col plasmid）;4、毒性质粒（virulence plasmid）;5、代谢质粒（Metabolic plasmid）;第三节细菌的基因转移和重组;野生型：从自然界中分离到的没有发生任何突变的微生物。能在基本培养基中生长，如以A和B两个基因表示这两种物质的合成能力。遗传型A+B+ 突变型：野生型突变之后，丧失了合成某物质的能力。不能在基本培养基上生长，只能生长在完全培养基上，如以A和B两个基因表示其丧失这两种物质的合成能力。遗传型A-B- ;（一）接合（conjugation）;1946年用E.coli的两个营养缺陷型所作的实验：;供体菌 受体菌;接合的具体过程;F因子的四种细胞形式;F’菌株 和F’因子;;F+（“雄性”）菌株与F– 相接触时，可通过性菌毛将F因子转移到F– 细胞中，使之也变成F+菌株。 F因子以很高的频率传递，但含F因子的宿主细胞的染色体DNA一般并不被转移。;;2 Hfr× F–;1. Hfr染色体双链中的一条单链在F因子处发生断裂，F因子位于环状单链DNA的两端，F因子的头先进入受体细胞，然后是细菌核染色体组，只有细菌核染色体组完全进入受体细胞之后，F因子的尾才能进入受体菌细胞，完成DNA的传递。 在没有外界干扰的情况下，全部转移过程的完成需要约120分钟。 2. 由于种种原因DNA转移过程常会发生中断，所以越是前端的基因进入F– 细胞的机会越大。F因子位于线状DNA的末端，进入受体细胞的机会最小，故这种接合引起转性的频率最低，但可以出现各种重组子。;;Hfr;接合中断试验与染色体图：;a;; R型活菌+S型死菌→ →S型活菌 定义：受体菌直接摄取来自供体菌的游离DNA片段，并把它整合到自己的基因组中，而获得部分新的遗传性状的基因转移过程，称为转化。 有关名词： 受体菌：recipient/receptor，转化基因的接受者 供体菌：donor，转化基因的提供者 转化因子：来自供体菌的DNA片段 转化子：transformant，将转化基因重组进入自身染色体组的重组子;;感受态的决定因素;②供体DNA片段（转化因子）大小适宜，分子量一般为1× 10