病原微生物高通量检测方法地研究进展_张国强.pdf

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  9 ·859 · doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2010.09.023  (江西省南昌市第二医院检验科, 南昌330003)    R446   A   1000-484X(2010)09-0859-05   , 、、 、、PCR , PCR , 、, 。PCR [3] 。2003 SARS ,Kirsc berg ,, PCR 6 , ,H1N1 - , ,、, 。 。 PCR : , , ,;; 。 。 , 2  PCR ,, 、、, 2.1 PCR   。 PCR (Real-time quantitative PCR), :PCR 、 PCR , PCR 、、 PCR ,Ct , 。Ct (Cy- 。 cle t res old,Ct ) 1, PCR 1 PCR , 1.1  PCR  PCR (multiplex ,DNA ,, PCR)PCR , Ct 。 PCR , ,Ct , [4,5] , 。 , 2.2  PCR   DNA ,。 PCR , [1] C amberian 1988 。 1.2  PCR  PCR :(1), ;(2) , PCR ;(3), , , [ 1] [2] 。 :(1954 -), , 1 PCR 。 Fig.1 Curve of Real-time PCR amplication ·860 · 2010 26 , SYBR Green I DNA ,。, , DNA , DNA ,, TEAA ,DNA , 。PCR :(1) 。DHPLC , , 3 :①(40 ~ ;(2) Ct 50 ℃)DNA , , PCR、 ;(3) (LOH );②(51~75 ℃) ,PCR Sout ern , Cp G ,;(4) ;③(70 ~80 ℃) , , ,RNA ,;(5) ,2[8,9] 。 [4-6] , 。 3.2   PCR  DHPLC :①: , DHPLC 96%~100%。② , :10 , , ,3。③, [7] 。 SARS , 。 RNA,, 5 、、, RNA ;100%,Ct , [8, 9] [10] 5%;42 SARS 。Hurtle DHPLC

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