生物:1.2《基因工程的基本操作程序》课件2(新人教版选修3).ppt

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一、基因工程别名、操作对象、操作水平、操作环境、实质或原理各是什么 二、限制酶的作用 三、DNA连接酶的作用 四、运输基因的载体必须具备的条件 五、 DNA连接酶与DNA聚合酶的异同 现代生物科技专题 1.2 基因工程的基本   操 作 程 序 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 基因工程操作的动画 目的基因的表达和检测 基因工程的基本操作程序 基因工程的目的基因    与生物抗逆性相关的基因 与优良品质相关的基因 与生物药物和保健品相关的基因 与毒物降解相关的基因 …… 目的基因的概念:目的基因是人们所需要转移或改造的基因,主要是指编码蛋白质的基因。 1、获取目的基因的方法有哪些? 2、什么叫基因文库,它包括哪些种类? 3、用PCR技术扩增基因需要哪些原料? 1、从基因文库中获取(序列未知) 2、利用PCR技术扩增(序列已知) 基因文库 基因组文库 部分基因文库--如:cDNA文库 聚合酶链式反应 目的基因的获取 3、人工合成 (基因比较小,序列已知) 反转录法 根据已知的氨基酸序列合成DNA 从基因文库获取目的基因 返回 根据目的基因的有关信息,如:   基因的已知核苷酸序列;   基因的功能;   基因在染色体上的位置;   基因的转录产物mRNA;   基因的表达产物蛋白质;    …… PCR扩增仪 利用PCR技术扩增目的基因 原理:DNA双链复制的原理 过程: 变性(90 ℃ -95℃)→退火:引物与单链互补结合(55 ℃ -60℃) →DNA聚合酶作用下延伸(70 ℃ -75℃) 条件:DNA模板、引物、DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、能量。 1、基因表达载体包括哪些必需组分? 各成分的作用是什么? 2、转化的概念,将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法分别有哪些? 基因表达载体的构建和将目的基因导入受体细胞 将目的基因导入受体细胞 - 转化 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 显微注射技术 感受态法 受体细胞 植物cell 动物cell 微生物cell 将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点:繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法: 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 DNA分子杂交 基因探针,是一段带有检测标记,且序列已知的,与目的基因互补的核酸序列。  基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。 1、探针需带有一定的标记,   可以用什么方法? 2、基因探针有哪些用途? 目的基因的表达和检测 接种实验 抗原-抗体杂交法 DNA-RNA分子杂交法 DNA分子杂交法 受体是否具有 转基因特征 个体水平 目的基因是否翻译 目的基因是否转录 目的基因是否导入 分子水平 方法 检测对象 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR技术 人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测:是否插入、转录、翻译 鉴定:是否有转基因特性 THE END, THANK YOU! 问答推广 百度知道问答 回鬻搋

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