金黄色葡萄球菌基因敲除质粒构建及应用.pdfVIP

金黄色葡萄球菌基因敲除质粒构建及应用.pdf

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中国组织工程研究 第 19 卷 第5 期 2015 –01 –30 出版 Chinese Journal of Tissue Engineering Research January 30, 2015 Vol.19, No.5 www.CRTER.org 金黄色葡萄球菌基因敲除质粒的构建及应用 卫 玮,李晓玲,袁文常(解放军兰州军区乌鲁木齐总医院临床检验诊断中心,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000) 文章亮点: 1 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌已经成为全球院内感染的首要致病菌,建立快速简单的基因敲除方法是研究耐 卫玮,女,1984 年生,四 甲氧西林金黄色葡萄球菌毒力、耐药性的重要技术。 川省剑阁县人,汉族,2006 2 用于金黄色葡萄球菌基因敲除的质粒主要使用温敏性质粒,如pBT2、pYT3 等。由于pYT3 质粒主要通过 年新疆大学毕业,主管技 师,主要从事细菌耐药方 酶切的方式构建,所以该质粒中可以利用的多克隆位点只有BamH Ⅰ、Sal Ⅰ、Hind Ⅲ 3 个酶切位点,这就 面的研究。 使得在构建不同的敲除载体过程中会受到一定的限制。因此在实验中,作者通过分子生物学方法构建了较为 实用的大肠杆菌-金黄色葡萄球菌穿梭质粒,并对金葡菌基因进行敲除,建立了简单的金葡菌基因敲除技术。 通讯作者:袁文常,博士, 3 作者已应用大肠杆菌-金黄色葡萄球菌穿梭质粒pYZ1/pYZ8 质粒对金葡菌多个基因进行敲除,其成功构建 主管技师,解放军兰州军 及应用为进一步研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性的毒力提供了有力保障。 区乌鲁木齐总医院临床检 验诊断中心,新疆维吾尔 关键词: 自治区乌鲁木齐市 实验动物;组织工程;金黄色葡萄球菌;甲氧西林;毒力;耐药性;质粒;基因敲除;同源重组;国家自然 830000 科学基金 主题词: doi:10.3969/j.issn.2095-4344. 抗甲氧西林金黄色葡萄球菌;毒力;基因敲除技术;质粒 2015.05.025 [] 基金资助: 国家自然科学基金青年项目

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