(简化)第十三章 RNA的生物合成.ppt

转录：以一段DNA的为模板，在RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol)作用下，合成出对应的RNA的过程。 RNA的复制：RNA指导的RNA合成。 一、DNA指导的RNA合成（转录） （一）转录的特点 1、转录的不对称性 结构基因并不位于DNA的两条链上.能转录RNA的那条DNA链称为有意义链(模板链、负链），而与之互补的另一条链称为反意义链（编码链、正链、无义链）。 2、转录的连续性 RNA转录合成时，以DNA作为模板，在RNA聚合酶的催化下，连续合成一段RNA链。 （二）RNA转录合成的条件 底物：四种核糖核苷三磷酸，即ATP，GTP，CTP，UTP。 模板(template)：DNA双链的一条链的一段。 RNA聚合酶（DDRP）：该酶在单链DNA模板以及四种NTP存在的条件下，不需要引物，即可从5‘→3’聚合RNA。 终止因子 （三）RNA聚合酶 全酶由五个亚基构成，即α2ββσ。 σ亚基与转录起始点的识别有关，而在转录合成开始后被释放，余下的部分（α2ββ‘）被称为核心酶。 2.真核RNA聚合酶 酵母RNA聚合酶Ⅰ和Ⅱ （四）RNA转录合成的基本过程 1. 原核生物的转录 (1)RNA-pol 识别并结合于启动子(promoter) 原核生物RNA聚合酶的σ因子识别转录起点，并促使核心酶结合和组装成全酶复合物。 启动子（promoter): 位于基因上游的与RNA聚合酶识别、结合并起始转录的一段DNA顺序。是RNA聚合酶结合DNA的位点. (2)转录起始和延伸 σ因子从全酶上脱离，余下的核心酶变构，与模板结合松驰，继续沿DNA链移动，按照碱基互补原则，不断聚合，RNA链不断延长。 转录泡(transcription bubble) ：是由DNA双链、RNA聚合酶与新合成的转录本RNA局部形成的结构,它贯穿于延长过程的始终。 (3)转录的终止 终止子（terminator）是指所转录的RNA行将结束时，模板DNA分子上出现的终止信号的序列。 a.终止点上游存在一个富含GC碱基的二重对称区，转录产生的RNA易形成发夹结构(hairpin)或茎环结构（stem-loop）阻止RNA聚合酶继续前进。 b.终止点前有一段由4-8个A组成的序列，因此转录产物的3’端为寡聚U，使新生链易于脱落DNA链 。 ② 依赖蛋白质因子而实现的终止作用，这种蛋白质辅因子称为释放因子（ρ因子）。RNA合成起始后，ρ因子即附着在新生的RNA链上，沿RNA链移动跟踪聚合酶，ρ因子赶上在终止位点暂停的聚合酶后促使新生的RNA链从三元转录复合物中解离出来，从而终止转录。 （6）真核与原核转录系统的异同： 真核的染色体和核小体结构对转录有影响； 真核细胞RNA聚合酶高度分工； 真核启动子以外的序列参与调节基因的转录； 真核转录与翻译不存在偶联； 真核转录的产物多为单顺反子，而原核多为多顺反子。 真核生物的转录需多种转录因子的参与。 二、RNA转录后的加工修饰 （一）mRNA的转录后加工 1．原核mRNA前体的加工 原核mRNA是多顺反子,每分子RNA中含几种蛋白质信息，RNA寿命短，转录没完成时，翻译已经开始 。 ??? ?例:乳糖操纵子，含Z,Y,A三个基因,分别编码半乳糖苷酶、透过酶及乙酰基转移酶 2．真核mRNA前体的加工 ?hnRNA: 为mRNA的前体,转录物中外显子与内含子间隔排列，需经剪接加工后生成mRNA。 （3）剪接（splicing)： 真核生物中的结构基因基本上都是断裂基因。结构基因中能够指导多肽链合成的编码顺序被称为外显子，而不能指导多肽链合成的非编码顺序就被称为内含子。 真核生物hnRNA的剪接通过形成套索状结构而将内含子切除掉。 小核糖核蛋白体参加剪辑过程 哺乳类mRNA二级结构U1snRNA组成 剪辑需要大量反平行RNA碱基对的重新组织 小核糖核蛋白体形成剪接体 剪接体装配过程 （4）内部甲基化： 由甲基化酶催化，对某些碱基进行甲基化处理。 （二）rRNA转录后加工 1．原核rRNA前体的加工 四膜虫前rRNA的自身剪接 （三）tRNA转录后的加工修饰 三、RNA的复制 （一）RNA的复制 RNA 病毒的遗传信息贮存在RNA分子中，当它们进入宿主细胞后，靠复制而传代，它们在RNA指导的RNA聚合酶催化下，以RNA为模板，按5‘→3’方向合成互补的RNA分子。 （二）RNA生物合成的抑制剂 1．嘌呤和嘧啶类似物 2．DNA模板功能的抑制剂 能插入DNA分子中阻止RNA聚合酶沿模板的移动。 （1）烷化剂 （2）放线菌素D （3）嵌入染料如