痉证方与痿证方对大鼠脊髓持续性压迫损伤局部细胞凋亡的影响.pdf

上 海 中 医 药 大 学 学 报 第 19卷第 1期 Vol. 19 N o. 1 　 2005年 3月 ACTA UN IV ER SITA T IS TRAD IT ION ISM ED ICAL IS SIN EN SIS PHARMACOLO G IA EQU E SHAN GHA I M ar. , 2005 痉证方与痿证方对大鼠脊髓持续性压迫损伤局部细胞凋亡的影响 施 　杞 　胡志俊 　王拥军 　李晨光 ( ) 上海中医药大学脊柱病研究所 　　上海中医药大学附属龙华医院伤骨科 上海 　200032 摘要 : 目的　研究大鼠脊髓持续性压迫后细胞凋亡的变化 ,探讨痉 、痿证方对大鼠脊髓持续性慢性损伤局部细胞凋亡 的影响 。方法 　　大鼠颈椎前路螺钉压迫颈脊髓 ,螺钉留置持续压迫 30 d 以产生慢性损伤 ,用原位末端标记技术的 TUN EL 法对模型组及用药组的细胞凋亡进行检测 。结果 　脊髓受压后 ,灰 、白质均有明显的神经细胞和胶质细胞凋 亡 ,并以白质为明显 ,经药物干预后 , 阳性染色的神经细胞和胶质细胞减少 ,染色变浅 。与假手术组相比,各模型组细 胞凋亡数明显增高 ,不同压迫程度组之间有显著性差异 。治疗组与模型组以及治疗组之间相比, 具有非常显著性差 异 ;痿证方组作用强于痉证方组 。结论 　脊髓持续性压迫损伤后 ,受压区神经细胞和胶质细胞都有明显的凋亡 ;痉证 方 、痿证方对脊髓慢性损伤后脊髓组织神经细胞和胶质细胞的凋亡有抑制作用 ,痿证方强于痉证方 。 关键词 : 脊髓损伤 ;大鼠模型 ;细胞凋亡 ;痉证方 ;痿证方 中图分类号 : R274. 9　81. 54　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 100886 1X (2005) 0 1003503 　　脊髓损伤后神经细胞死亡方式有两种 ,一是创伤直接造 性灌胃给药 ,约 2m l,连续给药 30 d。 成神经细胞的损坏 ,导致细胞坏死 ; 二是创伤后期炎症 、缺 1. 4　取材及标本制作 　氯氨酮 120m g/ kg腹腔注射处死动 血 、营养因子缺乏、损害因子分泌等造成细胞凋亡失控而增 物 , 以压迫点为中心取脊髓组织 1. 5cm ,每个标本切片 6 张 , ( ) 加 ,这是继发性损伤和慢性损伤细胞死亡的主要机制 。因 分别用于检测不同指标 其他指标检测另文发表 ,将标本 此 ,调整细胞凋亡在脊髓慢性损伤中具有特别重要的意义 。 用 4 %多聚甲醛 4 ℃固定 7 d,常规脱水 ,透明 ,浸蜡 ,包埋 ,横 本研究旨在研究中药痉证方 、痿证方对这种凋亡的影响 。 μ 截面切片 , 4 m /片 。 1. 5　检测方法 　用原位末端标记技术的 TUN EL 法 。石蜡 1　材料和方法