生物选修三 DNA重组技术的基本工具.ppt

基因工程产品 定向基因改造设想 什么叫平末端？ 磷酸二酯键 三、载体 1、作用： 2、种类：质粒、λ噬菌体衍生物 动植物病毒。 3、载体具备的条件 * * 1.1DNA重组技术的基本工具 专题1 基因工程 延熟保鲜转基因西红柿 研究者发现，控制植物衰老激素乙烯合成的酶基因，是导致植物衰老的重要基因，如果能够利用基因工程的方法抑制这个基因的表达，番茄就不会容易变软和腐烂了。 抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白晶体，能使棉铃虫等鳞翅口害虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物，使作物自身具有抵御虫害的能力。 抗虫棉 转基因鲑鱼 水母 转基因超级鼠 日本三得利公司2009年10月20日宣布，将于11月3日发售世界上首次培育成功的蓝玫瑰。 　　玫瑰的基因不能编码合成蓝色色素，三得利公司通过把三色紫罗兰的基因植入玫瑰，培育出含蓝色素的玫瑰，售价在2000日元至3000日元。 蓝色妖姬 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 基因工程的概念 基因工程：指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作DNA重组技术或基因拼接技术。 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 新的生物类型、生物产品 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 DNA重组技术的基本工具 分子手术刀—限制性核酸内切酶 分子缝合针—DNA连接酶 分子运输车—载体 识别特定的核苷酸序列(特异性) 断裂特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 黏性末端 平末端 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，限制酶是一种防御工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，使之失效，保证自身的安全。 因为含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或不具备这种限制酶的识别序列，或通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。 限制酶在原核生物中的作用是什么吗？ 为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的DNA？ 属名 种名 菌株(品系) 大肠杆菌R型菌株分离出的第一个限制酶 Escherichia coli R E co R Ⅰ 种名前两字母 (小写、斜体) 菌株 (品系) 罗马数字区分同一菌株分离出的不同酶 例：流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)d株系中第二种限制酶的命名： Hind II 粘质沙雷氏菌( Serratia marcescens sb)中第一种限制酶的命名： SmaⅠ 限制酶的命名 属名首字母 (大写、斜体) CT TCATGAATTCCGTACCCGGGCCTAA GAAGTACTTAAGGCATGGGCCCGGATT EcoRⅠ限制酶酶切位点 GGCATGGG AATTCCGTACCC 黏性末端 CTTCATG GAAGTACTTAA 平末端 SmaⅠ限制酶酶切位点 GGGCCTAA CCCGGATT 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 T 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切4个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA分子了。 二“分子缝合针”——DNA连接酶 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，是把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子才能形成。 作用部位： 是磷酸二酯键（扶手） 不是氢键（梯子） DNA连接酶将两条DNA链连接起来的酶。 “分子缝合针” DNA连接酶 共性 连接末端类