生物分离工程之吸附法..pptVIP

　吸附法;主 要 内 容;吸附法;吸附法的发展;常用的吸附剂;树 脂 的 网 络 骨 架;树 脂 的 网 络 骨 架;吸 附 法特点;吸附法的应用;;图21-1界面上分子和内部分子所受的力;吸附的类型;　　项目;物理吸附力的本质;分子引力/范德华力的总能量;范德华力-定向力;范德华力-诱导力;范德华力-色散力;在分子间相互作用的总能量中，各种力所占的相对比例是不同的。主要取决于分子的两个性质，即它的极性和极化度。极性越大，定向力作用越大；极化度越大，色散力的作用越大。诱导力是次级效应， 范德华力中的色散力是普遍的一种力 ;一种特殊的分子间作用力，介于库仑引力与范德华引力 之间的特殊定向力，比诱导力、色散力都有大;图示21-2 吸引力和推斥力;; 吸附等温线; 吸附等温线;Langmuir 吸附等温线;Freundlich吸附等温线;;四 影响吸附因素;吸附物性质: ①表面张力降低的物质 ②溶质在易溶解的溶剂中吸附量小 ③极性吸附剂易吸附极性物质 ④同系物极性越小，越易被非极性吸附剂吸附 溶液pH 的影响 （解离度） 温度的影响 （吸附热，溶解度） 其它组分的影响（促进/干扰/互不影响）;;1上样和洗脱 经过平衡的层析柱，当平衡液流到与固定相表面一致位置时，用滴管轻轻地把样品溶液加到固定相表面，要尽量避免冲动基质。加入样品液的体积一般应小于床体积的1/2 (当加入的样品量相同时，体积越小越有利于提高分辨率)。待样品液的液面流到固定相表面时，用滴管加入洗脱剂(其体积用液面距固定相表面的高度约5厘米计)，并在柱上端与装有洗脱剂的贮液瓶连接开始冼脱。同时在柱下端与部分收集器接通，立即进行分级收集(按体积或时间分管收集)。; 将吸附剂填装在玻璃或不锈钢管中，构成层析柱，层析时欲分离的样品自柱顶加入，当样品溶液全部流入吸附层析柱后，再加入溶剂冲洗。冲洗的过程称为洗脱，加入的溶剂称为洗脱剂。 ; 在洗脱过程中，柱内不断地发生解吸、吸附，再解吸、再吸附的过程。 即被吸附的物质被溶剂解吸而随溶剂向下移动，又遇到新的吸附剂颗粒被再吸附，后面流下的溶剂又再解吸而使其下移动。经过一段时间以后，该物质??向下移动一定距离。此距离的长短与吸附剂对该物质的吸附力以及溶剂对该物质的解吸(溶解)能力有关。 不同的物质由于吸附力和解吸力不同 ，移动速度也不同。吸附力弱而解吸力强的物质，移动速度就较快。经过适当的时间以后，不同的物质各自形成区带，如果被分离的是有色物质的话，就可以清楚地看到色带(色层)。 如果被吸附的物质没有颜色，可用适当的显色剂或紫外光观察定位，也可用溶剂将被吸附物从吸附柱洗脱出来,再用适当的显色剂或紫外光检测，以洗脱液体积对被洗脱物质浓度作图，可得到洗脱曲线。 吸附柱层析成败的关键是选择合适的吸附剂、洗脱剂和操作方式。 ;; (二) 洗脱涤的选择 洗脱剂指的是溶解被吸附样品和平衡固定相的溶剂。合适的洗脱剂应符合下列条件： ①纯度较高； ②稳定性好； ③能较完全洗脱所分离的成分； ④黏度小； ⑤易和所需要的成分分开。 ; 在实践中，选择洗脱剂的顺序是由极性小到极性大(正向层析)。当把极性小的洗脱剂换成极性大的时，宜先将极性大的和极性小的洗脱剂混合使用，浓度则由低到高。总之，选用洗脱剂的原则是能较完全地洗脱所要分离的成分，并力求用量少、洗脱时间短。 为了获得满意的分离结果，若峰与峰之间有重叠，宜降低洗脱剂的强度，若峰间距离过大，或某些成分不能洗脱时，宜加大洗脱剂的强度(极性)，成分复杂时，可采用洗脱剂由弱到强的梯度洗脱(方法见离子交换层析)。 ;;六 常用吸附剂种类;1.大网格聚合物吸附;大网格树脂吸附法;区别： 介质不同： 离交法－离交树脂，骨架上接有离子交换基团，利用表面层 　　　　和孔隙中离子基团起作用； 吸附法－吸附树脂，无离交基团（称白球），利用外表面和 　　　　孔隙内表面分子起作用。 机理不同： 离交法－离子间静电引力吸附，要求树脂和物质的电离度α↑ 吸附法－分子间范德华引力吸附，要求物质的电离度α↓ ;大网格吸附树脂;大网格吸附剂结构与类型;比表面测定仪,微球硅胶,液氮,高纯氮,氢气，秒表 ;BET法的源由; 表21-4 Amberlite 大网格吸附剂的物理性质 ;大网格聚合物的合成;大网格吸附剂吸附条件选择;;2．无机盐的影响 　无机盐存在，对吸附不仅无干扰，还有促进作用（盐析）。 3．吸附pH 　弱酸物质：pHpK 弱碱物质：pHpK （呈分子状态） 　中性物质：pH无影响（不会电离）。; 例： 　林可、红霉素、SPM ? 弱碱性， pH? 吸附量