设计生物化学实验动物组织DNA的提取.pptVIP

5. 加入2.5倍体积的-20℃预冷的无水乙醇沉淀 DNA,观察现象。 6. 3000r/m离心10min，弃乙醇。 7. -20℃预冷的75%乙醇洗涤，3000r/m离心5min，弃乙醇，55℃干燥DNA. DNA纯化 将已提取的DNA粗品加入生理盐水中，再加入固体NaCl使沉淀最少，即DNA溶解度最大。 3000r/m离心5min，吸取上清液加入乙醇析出。 3000r/m离心5min，弃乙醇得到较纯净的DNA. 注意事项 选择的实验材料要新鲜，处理时间不易过长。 在加入细胞裂解缓冲液前，细胞必须均匀分散，以减少DNA团块形成，取上清液时注意不要吸起中间的蛋白质。 提取的DNA不易溶解：不纯，含杂质较多；加溶解液太少或沉淀物太干燥，都将使溶解变得很困难。 酚/氯仿/异戊醇抽提后，其上清液太黏不易吸取含高浓度的DNA，可加大抽提前 缓冲液的量或减 少所取组织的量。 琼脂糖凝胶电泳检测 实验目的 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳 鉴定DNA的原理与方法 实验原理 琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA片段最为常用的方法之一，这种方法简便易行。而且琼脂糖可以灌制成各种形状、大小和孔径，在不同的装置中进行电泳，如果有必要，还能够从凝胶中回收DNA谱带。 琼脂糖凝胶的分离范围较广，选择不同凝胶浓度和装置，从50个碱基对到几兆不同长度的DNA都可以实现分离。DNA在