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2017-05-28 发布于湖北
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CRISPRCas9技术制备Mindin基因敲除小鼠

第卷第期 ( ) 55 6 厦门大学学报自然科学版 Vol.55 No.6 年月 ( ) 2016 11 JournalofXiamenUniversit NaturalScience Nov.2016 y : / doi10.6043 .issn.0438-0479.201604028 j ·研究简报 · 利用 / 技术制备基因敲除小鼠 CRISPRCas9 Mindin 1 2 1* , , 纪慈数赵志刚贺颖 ( , ; , ) 厦门大学实验动物中心福建厦门广州军区武汉总医院湖北武汉 1. 3611022. 430000 摘要: ( ), , 针对基因编码序列设计条单链向导制备相应质粒将表达和蛋白的质 Mindin 3 RNA sRNA sRNA Cas9 g g , , 粒共同电转入小鼠成纤维细胞中通过药物筛选获得细胞库经单克隆测序检测细胞库中基因组的突变效率选择 L929 . , 效率最佳的体外转录获取和进行小鼠受精卵的显微注射后提取小鼠基因组测序鉴 sRNA. sRNA Cas9mRNA DNA g g , , 定产生的只小鼠中只发生不同程度的碱基插入或缺失其中号小鼠缺失个碱基造成移码突变基 . 40 17 23 10 Mindin , , 因表达被破坏成功构建出Mindin基因敲除小鼠为深入研究Mindin基因的生物学功能奠定了基础. 关键词: / ; ; CRISPRCas9基因敲除 Mindin 中图分类号: 文献标志码: 文章编号: ( ) Q789 A