川芎挥发油对发热大鼠下丘脑环氧化酶-2表达的影响.docVIP

川芎挥发油对发热大鼠下丘脑环氧化酶-2表达的影响 作者：杨金蓉 宋军 胡荣 华桦 李莉 【摘要】 　　目的探讨川芎挥发油解热作用机理。方法采用免疫组化及RT-PCR方法对啤酒酵母发热大鼠下丘脑组织环氧化酶－2（COX-2）蛋白及mRNA表达的影响进行研究。结果模型组大鼠下丘脑COX-2蛋白和mRNA表达均高于正常对照组（P0.01），川芎挥发油高、中剂量组COX-2蛋白和mRNA表达低于模型组（P0.01或P0.05），低剂量组与模型组相比无明显差异（P0.05）。结论川芎挥发油解热机理之一可能是抑制大鼠下丘脑COX-2的表达从而减少PGE2的产生使中枢体温调定点下调达解热效应。 【关键词】 川芎挥发油； 解热； 环氧化酶-2 　　Abstract：ObjectiveTo investigate the antipyretic mechanism of essential oil of ligusticum chuanxiong Hort(CH).MethodsExpressions of COX-2 protEin and mRNA in hypothalamus of brewer’s yeast-induced fever rats were checked using IHC and RT-PCR.ResultsExpressions of COX-2 protEIn and mRNA in hypothalamus of model group were higher than normal group, high and middle doses of CH could significantl decrease the expressions as compared with model group, but low dose of CH had no obvious effect. ConclusionOne of the antipyretic mechanism of essential oil of Ligusticum chuanxiong Hort.(CH) may be inhibit the expression of COX-2 protein and mRNA in hypothalamus of rats, thereby reduce the content of PGE2 that lowers the set point and produces antipyretic effect. 　　Key words：Essential oil of Ligusticum chuanxiong Hort. ； Antipyretic； COX-2 　　笔者前期研究发现川芎挥发油(CH)具有明显的解热、镇痛、抗炎作用，且其解热机理与降低下丘脑PGE2含量有关（杨金蓉《川芎挥发油解热作用部分机理研究》.成都中医药大学2002博士学位 论文 ）。环氧化酶（COX）是前列腺素生物合成的关键酶，有两种不同类型：COX-1和COX-2。其中，COX-1是一个组成酶，与生理性前列腺素合成有关；COX-2则是一个诱导酶，可以被脂多糖等多种因子诱导，与发热、炎症密切相关［1］。为进一步探讨川芎挥发油解热作用的机理，我们观察川芎挥发油对发热大鼠COX-2表达的影响。 　　1 器材与方法 　　1.1 药物 川芎挥发油：川芎购于都江堰市徐渡乡，经成都中医药大学鉴定教研室鉴定为Ligusticum chuanxiong Hort.。川芎经水蒸气蒸馏法提取挥发油，无水硫酸钠脱水后备用。临用时以1%吐温80配成所需浓度乳剂。 　　1.2 试剂及仪器 啤酒酵母：将新鲜啤酒酵母(成都啤酒厂提供)于鼓风条件下60℃烘干，粉碎，过100目筛后低温保存，临床用时以水调制为20%的悬液备用，用时摇匀。安痛定：成都制药一厂生产，批COX-2免疫组化试剂盒：武汉博士德生物工程有限公司产品。TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0试剂盒：宝生物工程（大连）有限公司产品。WZ-03温度仪:上海医用仪表厂制造。PCR仪：美国PE公司产品。凝胶成像系统、电泳仪：美国伯乐公司产品。高速冷冻离心机：sigma公司产品。BP211D 电子 天平：德国骞多利斯产品。OLYMPUS显微镜：日本产品。 　　1.3 动物SD成年雄性大鼠，体重（200±20）g，共60只，购于成都中医药大学实验动物中心，合格证号，川室动管字第8号。 　　1.4 方法参照 文献 ［2］，动物在实验环境［实验室温度控制在（25±1），相对湿度（60±2）%］中每日测肛温（测温探头插入肛门2 cm）两次，连续5 d，