氯化镍对家兔离体窦房结自律细胞的影响_0.docVIP

氯化镍对家兔离体窦房结自律细胞的影响 作者：沈建昕 陈丽娜 张三明 张晓云 【摘要】 目的：探讨氯化镍对家兔窦房结自律细胞的 影响 。 方法 ：利用细胞内微电极记录技术，观察20例家兔窦房结细胞动作电位以及氯化镍对窦房结细胞动作电位产生的影响。结果：用180μmol/L NiCl2灌流后窦房结自律细胞的VDD、APA、Vmax、RPF均明显下降（P＜0.01），APD、APD90显著延长，MDP、APD50均无明显改变（P＞0.05）。结论：氯化镍对窦房结自律细胞的动作电位0相和4相去极离子流有明显的抑制作用。 【关键词】 氯化镍；窦房结；电生理 The Influence of NiCl2 on Spontaneous Cells of Isolated Sinoatrial Node of Rabbit node. Methods: The characteristics of intracellular action potential were recorded from sinoartial node of 20 rabbits with mircoelectrode technique, and also that of sinoartial node perfused with 180μmol/L NiCl2 were recorded. Results: After perfused with NiCl2,The VDD、APA、Vmax、RPF obviously decreased （P＜0.01） and the APD、APD90 were significant prolonged （P＞0.05）in pacemaker cells of sinoartial node.Conclusion: It appears that NiCl2 has notably inhibitive action on the ion beam taken place in the depolarization of phase 0 and phase 4 of pacemaker cells in sinoartial node. 【KEY WORDS】 Niekel chloride ；Sinoatrial node；Electrical physiology 随着电生理技术的迅猛 发展 ，对心肌细胞离子通道的 研究 越来越深入。Ca2+通道就广泛存在于细胞膜上，Ca2+通道的类型有多种，如电压门控性通道和受体门控性通道，其中以电压依赖性的Ca2+通道中的T型（IcaT）和L型（IcaL）最为重要。二价阳离子Ni2+作为一种工具药，已用于心肌细胞的研究。现已证实，Ni2+可选择性的阻断T型Ca2+通道（IcaT）。为进一步阐明氯化镍的作用机制，本实验采用常规玻璃微电极细胞内记录技术，观察其对家兔窦房结自律细胞动作电位的影响。 1 材料和方法 1.1 实验动物 体重2.5～3.5kg健康杂种家兔，雌雄不拘，由本校实验动物中心提供。 1.2 兔窦房结标本的制备 敲击家兔后脑致昏后迅速开胸取出心脏，置于纯氧饱和并加温至36左右的Locke液中，经冠状动脉冲洗后，将主动脉及右心室面朝上固定于标本盒内，于靠近心尖处剪开右心室，用一细玻璃棒从右心室插入上腔静脉，沿玻璃棒向上腔静脉方向顺势剪开右心耳，将右房前壁向左掀开，可见一相对粗大的界嵴，界嵴与上腔静脉之间的半透明组织即为窦房结。留取少量的界嵴剪下窦房结，用不锈钢针固定于标本槽底部的硅橡胶上，使用（36±0.5）的改良Locke液恒温、恒速灌流，流速5ml/min，灌流液中持续充以氧气。 1.3 窦房结细胞动作电位的记录 将标本置于标本槽中，用一微电极引导窦房结细胞的动作电位。细胞内玻璃微电极引导的电信号经DWF—3型微电极放大器放大后，一路输入监听器监听，另一路经高速数模转换器输入微机，自动显示电信号，用MAP2程序显示、采样、存储动作电位并进行 分析 其各项参数指标。如不能直接记录到自发电位，则需要进行电刺激，将刺激电极置于标本远离瓣膜一端的心肌组织上，给一波宽2ms、频率1Hz，二倍于阈强度的方波刺激，刺激时间由数秒至数分不等，直至诱发出稳定的自发节律，停止电刺激，待自发节律稳定后开始实验。 1.4 窦房结律细胞动作电位参数分析 放大后的窦房结自律细胞动作电位信号输入微机A/D转换器，采集动作电位波形，利用心肌细胞跨膜动作电位自动分析软件MAP2分析，测算窦房结细胞（SANC）动作电位的各项参数：最大舒张电位（MDP）、动作电位幅值（APA）、最大除极速率（Vmax）、舒张期除极速率（VDD）、自发放电频率（RPF）、动作电位时