经典免疫学技术详解.pptVIP

载体种类： 血细胞 聚苯乙烯胶乳颗粒（羧化） 2 间接凝集 Passive Agglutination 与直接凝集不同，间接凝集反应中的可溶性抗原或抗体需要吸附或偶联在一种与免疫无关的、具有一定大小的不溶性颗粒物的表面，使其成为致敏载体。 间接血凝试验，胶乳凝集试验，活性碳粒试验 正向间接凝集反应，反向间接凝集反应 Antigens on a carrier molecule, such as latex, combine with patient’s sample for antibody detection. Click on image above wait for animation to begin. 2.1 正向间接凝集 Forward Passive Agglutination Antibody is bound to the carrier molecule, which is then mixed with patient’s sample to detect antigen. Click on image above wait for animation to begin. 2.2 反向间接凝集试验 Reverse Passive Agglutination 提高了单纯抗原抗体反应的灵敏度 对微量抗原（真菌毒素）检测具有一定优势 Antibody reagent is combined with patient’s specimen. If patient’s specimen contains the antigen for that antibody, they will react. Erythrocyte（红细胞） is added. A positive reaction will show no agglutination. A negative reaction shows agglutination between reagent antibodies and antigen. Y Y Y Y Y Y 3 血凝抑制反应 Inhibition of Agglutination + - 含血凝素（HA）的病毒能凝集人或动物红细胞，称为血凝现象！ Jules Bordet（1870-1961） Discoverer of complement 19世纪末 概念：新鲜血液中含有的一种不耐热成分，可辅助和补充特异性抗体介导的免疫溶菌、溶血作用； 特点：补体的激活没有抗原抗体特异性； 原理：作为一种通用试剂来检测反应体系中抗原抗体复合物的存在，并利用补体对红细胞的裂解作用，通过红细胞的变化可以很容易的对反应进行示踪。 C. 补体参与的抗原抗体反应 补体结合试验原理 受检系统 指示系统 溶血反应 补体结合试验 1.仅有抗原或抗体 补体 红细胞 溶血素 阳性 阴性 2.抗原抗体反应 红细胞 溶血素 阴性 阳性 抗原 抗体 补体 抗原/抗体 D. 中和反应 中和试验是免疫学和病毒学中常用的一种抗原抗体反应试验方法，用以测定抗体中和病毒感染性或细菌毒素的生物学效应。 凡能与病毒结合，使其失去感染力的抗体又称中和抗体。能与细菌外毒素结合，中和其毒性作用的抗体称为抗毒素。 中和试验可以在敏感动物体内(包括鸡胚)，体外组织(细胞)培养或试管内进行。观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡；能否抑制病毒的细胞病变效应或中和毒素对细胞的毒作用；以及测定抗体的其他生物学效应。 小结 可溶性抗原与相应抗体结合所发个的沉淀反应(precipitation) 颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的凝集反应(agglutination) 抗原抗体结合后激活补体所致的补体结合反应(complement fixation reaction)和细胞溶解反应(cytolysis) 细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应 (neutralization) * * 溶液: 在澄清的溶液中，原本完全溶解的抗原与抗体之间发生反应，凝聚成为肉眼可见的絮状或颗粒状的不溶性沉淀物。 * * Most common application is testing for syphilis, detecting antibodies to reagin. Patient’s serum is placed within a ring on a slide or card. A measured volume of reagent containing antigen is placed in the ring. The slide or card is rotated to mix th