第6章 CIK细胞免疫治疗.ppt

CIK细胞免疫治疗;我国肿瘤现状;肿瘤;The Three Phases of the Cancer Immunoediting Process;生物治疗的原理;Virchow,对肿瘤免疫渗透进行了描述;免疫细胞类型;细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）;CIK细胞的杀瘤机制 ;CIK细胞中的效应细胞是CD3+和CD56+细胞，在正常人外周血中极其罕见，仅1%—5%。 在体外经多因子培养2到3周，CD3+CD56+细胞迅速增多，较培养前升幅可达1000倍以上。 CIK细胞治疗属于过继细胞免疫疗法，由于CIK细胞溶瘤作用是非MHC限制性的，即不受肿瘤组织类型的限制，因此对任何一种肿瘤均有杀伤作用，但对高抗原表达的癌症疗效最好。;;;;CIK细胞治疗适应症;Karnofsky（卡氏，KPS，百分法）功能状态评分标准;CIK细胞治疗禁忌症;细胞治疗示意图;CIK细胞的体外来源;病人采血前注意事项;;仪器：超净台或生物安全柜，离心机、水浴锅、微波炉、天平、移液枪、显微镜 准备材料：剪刀、镊子、培养瓶，离心管/~架，5ml/10ml/25ml移液管，滴管 试剂：CIK培养基，生理盐水，硫酸庆大霉素，各种细胞因子等 消毒用品：75%酒精，无菌纱布，酒精棉球;分离PBMNC;CIK细胞培养流程;CIK细胞回输时的一些准备工作;CIK细胞治疗的副反应及处理;谢谢！;人体外周血单核细胞分离（SOP）;注意事项： 整个过程要严格无菌操作； 将血加入淋巴细胞分离液时，必须保持两种液体界面清晰； 用滴管吸取淋巴细胞层时，要掌握好力度，在细胞层上作各方向吸取，勿吸入其他层液体； 操作应轻柔，细胞悬液要充分混匀，避免损伤细胞活力及丢失细胞。;CIK细胞制备（SOP）;8. 以后每2~3 d传代一次。10 d后，取细胞悬液送外检（检测细菌、真菌、支原体，结果为阴性方可用）； 9. 14 d后，收集细胞，用于细胞治疗； 10. 收集治疗：将生长旺盛的CIK细胞，收集，离心，留样并进行无菌检验，洗涤2~3次，计数细胞数和测定细胞活力（每次输入细胞数要＞2×109，细胞活力＞95%）； 11. 用一次性无菌滤器过滤细胞； 12. 将细胞悬浮于50~100 ml的生理盐水中＋IL-2 10万单位＋人白蛋白10 ml，混合，封口，用输血速度给病人静脉滴注，2 h内输完； 13.一个疗程为5次，病人可连续输入细胞，也可隔天输入（临床医生决定）。;培??到7天的CIK;培养到11天的CIK