血清蛋白质浓度定量测定资料.pptVIP

【计算】 （一） 绘制标准曲线。 （二） 以测定管吸光度值，查找标准曲线，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。 （三） 再从标准管中选择一管与测定管光密度相接近者，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。 BCA 法定量蛋白质浓度 BCA法是近来广为应用的蛋白定量方法。 操作简便，快速，灵敏度高，准确，试剂稳定性好，经济实用，抗干扰能力强 【原理】：碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。 【原理】： 基本原理 BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量： 在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu+（biuret reaction）。BCA与Cu+结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562 nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。 【试剂】 1、 试剂A： 分别称取10g BCA二钠盐、20g无水碳酸钠、0.16g酒石酸钠、4g氢氧化钠 、9.5g碳酸氢钠，混合调PH值至11.25，加水至1L。 2、 试剂B：4％硫酸铜。 3、 BCA工作液： 试剂A 100ml ＋ 试剂B 2ml混合。 操作步骤 1. 先将solutionA 摇晃混匀，根据样品数量，按50体积solution A加1体积solutionB试