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6 五章 人工授精
§5~1 概述 人工授精 优越性 充分发挥优良种公畜的种用价值和配种效能 §5~2 采精 基本要求 一、采精前的准备 (一) 采精场的要求及主要设施 (二) 台畜的准备 台畜:是供公畜爬跨射精时进行精液采集用的采精台架,可分为活(真)台畜和假台畜两类。 (三)采精器械与人员的准备 器械的清洗与消毒:传统的洗涤剂是2%~3%的碳酸氢钠或1%~1.5%的碳酸钠溶液。肥皂或洗衣粉也是采精场常用的洗涤剂,但安全性不及前者。 (四)种公畜的准备 清洁消毒 (五)假阴道的准备 假阴道:是模仿母畜阴道内环境条件而设计制成的一种人工阴道 (五)假阴道的准备 假阴道:是模仿母畜阴道内环境条件而设计制成的一种人工阴道 二、采精方法 假阴道法 徒手采精法 三、采精频率 采精频率:指每周内对公畜的采精次数。 §5~3 精液品质检测 一、精液品质检查基本原则 二、精液品质检测方法 (一)精液外观检查 (二)PH值 pH试纸比色 (三)精子活力测定 精子活力(sperm motility) (四) 精子密度检查 精子密度(sperm concentration) (四) 精子密度检查 精子密度(sperm concentration) 血细胞计测定法操作步骤 100~250倍显微镜下寻找计算室(面积1mm2,高0.1mm) 血细胞计测定法操作步骤 100~250倍显微镜下寻找计算室(面积1mm2,高0.1mm) 血细胞计测定法操作步骤 100~250倍显微镜下寻找计算室(面积1mm2,高0.1mm) 血细胞计测定法操作步骤 100~250倍显微镜下寻找计算室(面积1mm2,高0.1mm) 1、精子畸形率的检查 畸形精子:形态和结构不正常的精子。 畸形类型 头部畸形 检查步骤 取样,推片,自然干燥 2、顶体异常率的检查 正常精液中,牛5.9%、猪2.3%的异常率对受精影响不大,牛超过14%、猪4.3%,受精显著下降。 §5~4 精液的稀释 精液的稀释:指在精液中加入适宜于精子存活并能保持其受精能力的稀释液。 一、稀释液的主要成分及作用 稀释剂 二、稀释液的种类 现配现用稀释液 三、稀释液的配制原则及注意事项 一切用具必须严格洗净消毒。 §5~5 精液的保存 精液保存的目的。 抑制精子代谢和延长精子存活的途径 保存精液与空气隔绝,制造精子的缺氧环境。 一、常温保存 原理、方法 三、精液冷冻保存 (一)原理 (三)冷冻精液保存技术程序 (三)冷冻精液保存技术程序 §5~6 输精 一、输精前的准备 二、输精方法 牛:阴道开膣器法 直肠把握子宫颈法 注意事项 注意事项 精子畸形率:精液中畸形精子数占精子总数的百分率。 在正常精液中常有些畸形精子出现,一般不超过20%,对受精力影响不大。 优良品质精液的精子畸形率,牛、猪不超过18%,羊不超过14%,马不超过12%。 (五) 精子形态学检查 颈部畸形 中段畸形 主段畸形 正常精子 畸形精子 96%乙醇固定2~5min,冲洗 美兰、龙胆紫或蓝黑墨水染色2~5min 冲洗,自然干燥,600倍下检查。 方法 固定:1~2ml福尔马林磷酸盐缓冲液固定,如精液中含 卵黄,则用含甲醛的柠檬酸盐溶液固定。 抹片 染色:用姬姆萨液染色1.5h~2h,水洗,自然干燥。 镜检:1000X 图5-8 精子顶体的异常 1.正常顶体 2.顶体膨胀 3.顶体部分脱落 4.顶体完全脱落 目的 营养剂 保护剂 其他添加剂 常温保存稀释液 低温保存稀释液 冷冻保存稀释液 稀释液和蒸馏水应保持新鲜。 药品成分要纯净,称量要准确。 蛋黄和奶类应保持新鲜。 抗生素、酶类、激素类、维生素等的添加。 四、精液的稀释方法 现行的精液保存方法 常温保存(15~25℃) 低温保存(0~5℃) 冷冻保存(―79~―196℃) 加入适宜成分,造成精子的弱酸环境。 降低温度,造成抑制精子活动的低温环境。 加入适量抗生素,造成精子的抑菌环境。 加入适量营养及保护物质。 二、低温保存 原理、方法 (二)甘油的防冻害作用 1、采精及精液品质检查 2、精液的稀释:一次稀释、两次稀释 3、降温和平衡 4、精液的冻结 大白 假阴道法 假阴道法 假阴道法 BACK 假阴道法 假阴道法 假阴道法 假阴道法 徒手采精法 图5-6 电刺激采精器 A.电源 B.电极 C.棒状电极 BACK 电刺激采精法 图5-7 公牛直肠按摩采精法 A.按摩精囊腺 B.按摩输精管壶腹 1.精囊腺 2.阴茎 3.输精管壶腹 按摩采精法 采精频率确定:生精能力、精子在附睾内的贮存量、每次射精的精液精子密度以及公畜体况。 - 40~80 - 3.0~7.0 0.5~2.0 2~
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