第2章 RT-PCR说明书.pdfVIP

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2017-05-28 发布于北京
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第2章 RT-PCR说明书.pdf

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Code No. RR014A 研究用 PrimeScriptTM RT-PCR Kit 说明书 v201301Da 目录内容页码 ● 制品内容 1 ● 保存 2 ● 原理 2 ● 试剂盒特点 3 ● 使用注意 3 ● 实验操作 4 ● PCR 反应条件 6 ● 实验例 6 ● RNA 样品制备 7 ● 关联产品 7 PCR （Polymerase Chain Reaction ；聚合酶链式反应）是一种使用两条引物在目的DNA序列两侧扩增特异性DNA片段的过程。它是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法，但RNA不能直接被扩增。经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后，PCR法便可应用于RNA的解析了。迄今为止，此方法已广泛应用于RNA 的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 PrimeScript RT-PCR Kit是具有良好的延伸性能与高扩增效率的2 Step RT-PCR试剂盒。反转录反应使用了 Takara Bio Inc.独自开发的M-MLV由来的新型反转录酶PrimeScript RTase ；PCR反应使用了扩增性能良好的Hot Start 型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS。本试剂盒具有以下优点： 1. 进行高效的RT-PCR扩增。 2. 在标准的RNA反转录反应温度（42℃）下，便可使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸，可以避免RNA 在高温条件下的降解。 3. 能有效抑制非特异性的PCR扩增。本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需的全部试剂。 ● 制品内容（50 次量*1 ） 1.PrimeScript RTase （for 2 Step ） 25 μl 2.5×PrimeScript Buffer 200 μl 3.RNase Inhibitor （40 U/μl ） 25 μl 4.dNTP Mixture （10 mM each ）