液相色谱法测定水样中的苯.docVIP

液相色谱法测定水样中的苯 一、实验目的 1．熟悉戴安SmmitP680A液相色谱仪的整套装置、工作原理、工作流程；会较熟练操作和使用Chromeleon控制分析软件包。 2．掌握外标法测定苯和甲苯的实验方法。 二、 实验原理 液相色谱法就是同一时刻进入色谱柱中的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱中运行时，在两相间进行反复多次（103～106次）地分配过程，使得原来分配系数具有微小差别的各组分，产生了保留能力明显差异的效果，进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开来，最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器，在记录仪上或色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。测定各组分在色谱图上的保留时间（或保留距离），可直接进行组分的定性；测量各峰的峰面积，即可作为定量测定的参数，采用工作曲线法（即外标法）测定相应组分的含量。 高效液相色谱仪是实现液相色谱分离分析过程的装置。贮液器中存贮的载液（用作流动相的液体常需除气）经过过滤后由高压泵输送到色谱柱入口（当采用梯度洗脱时，一般需用双泵系统来完成输送）。样品由进样器注入载液系统，而后送到色谱柱进行分离。分离后的组分由检测器检测，输出信号供给记录仪或数据处理装置。如果需收集馏分作进一步分析，则在色谱柱出口将样品馏分收集起来，对于非破坏型检测器，可直接收集通过检测器后的流出液。其中输液泵，色谱柱及检测器是仪器的关键部件。 三、仪器与试剂 1．仪器 SmmitP680A液相色谱仪(戴安公司) 四元梯度泵 P680A 170四通道阵列紫外检测器UVD170U 柱温箱TCC-100 色谱柱：C18色谱柱及保护柱 手动进样器 流动相：甲醇－水(80+20)????????? 流速：1.0 mL·min－1 检测波长：254 nm 2） 微量注射器、容量瓶 2．试剂 甲醇（色谱纯）、二次蒸馏水、苯 五、实验步骤 1．配制标准溶液 以甲醇为溶剂，于容量瓶中配制苯标准溶液，浓度分别为1.0×10-5、2.0×10-5、5 .0×10-5和 1.0×10-4 mol/L 。 2．开启电脑及色谱仪各部分，等电脑自检完毕准备使用。 3．用微量注射器抽取50μL溶液，注射入进样口。注意不要将气泡抽入针筒。在相同的色谱条件下，分别测定苯各标准溶液及浓度未知样品。 六、数据处理及分析 七、思考题 1．与气相色谱法比较，液相色谱法有那些优点？ 2．流动相为什么要预先脱气?常用的脱气方法有哪几种? 3．对液相色谱流动相有何要求?