第6章 Amplex Red荧光法检测组织工程瓣膜.pdfVIP

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2017-05-29 发布于北京
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第6章 Amplex Red荧光法检测组织工程瓣膜.pdf

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中国胸心血管外科临床杂志2007年2月第14卷第1期ChinJ ClinThoracCardiovasc 2007，V01．14，No．1 ·27· Surg，February 秀囊础鞘爨治’罄j舅 AmplexRed荧光法检测组织工程瓣膜赖氨酰氧化酶活性洪昊董念国史嘉玮 (华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科，武汉430022) 摘要： red荧光法检测组织工程心脏瓣膜(tissue heartvalve，TEHV)中赖氨酰目的采用Amplex engineered 氧化酶(1ysyloxidase，LOX)的活性。方法经胰蛋白酶+乙二胺四乙酸、聚乙二醇辛基苯基醚和核酸酶处理，去除 d，猪主动脉瓣叶的细胞成分，然后在其表面种植大鼠肌成纤维细胞，构建TEHV。用高糖培养基在体外培养瓣膜27 再用不含酚酞和血清的培养基培养24h，收集此时的培养基作为样本，用Amplexred荧光法检测样本中LOX的浓度，同时应用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测TEHV中I。()XmRNA的表达。结果样本中LOX的荧光值为达，与Amplex 结论 red荧光法检测TEHV中LOX的活性具有可行 red荧光法检测的结果相一致。应用Amplex 性，并为反映LOx对TEHV细胞外基质中胶原交联的重要作用提供了方法依据。关键词： red荧光法； Amplex 组织工程心脏瓣膜；赖氨酰氧化酶；胶原交联中图分类号： R654．2文献标识码： A 文章编号： 1007—4848(2007)01—0027—04 RedFluorometricforDetectionof OxidaseinTissue HeartValveHONG Amplex Assay Lysyl Engineered Hao， DONG Jia—wei． ofCardiovascular Medical Nian—guo，SHI (Department Surgery，UnionHospital，n”gji Scienceand 430022，P．R．China) of College，HuazhongUniversity Technology，Wuhan author：DONG Corresponding Nian—guo，E—mail：dongnianguo@hotmail．corn Abstract： redfluorometrictodetectthe Amplex assay oxidase(LOX)enzymeactivity ObjectiveUsing lysyl intissue heartvalve(TEHV)．MethodsPorcineaorticvalvesweredecellularizedwith engineered