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载体构建介绍精要
载体构建;;1.载体简介;1.1载体;1.2载体的分类;噬菌体载体
利用噬菌体作载体，主要是将外来目的DNA替代或插入中段序列，使其随左右臂一起包装成噬菌体，去感染大肠杆菌，并随噬菌体的溶菌繁殖而繁殖。
;病毒载体
感染动物的病毒可改造用作动物细胞的载体。由于动物细胞的培养和操作较复杂、花费也较多，因而病毒载体构建时一般都把细菌质粒复制起始序列放置其中。使载体及其携带的外来序列能方便地在细菌中繁殖和克隆，然后再引入真核细胞。
现在人们还在不断寻找新的载体，如叶绿体或线粒体DNA也有可能成为载体。
;
克隆载体
中间载体
卸甲载体
;1.2载体分类;1.2载体分类;1.2载体分类;1.2载体分类;1.2载体的功能;1.3载体应具备的条件;2.载体构建（酶切连接）;2.1目的基因的获得;2.4 PCR产物纯化;2.5 TA克隆;体系：限制性核酸内切酶 2.5 μL
10 × buffer 5.0 μL
质粒 20 μL
ddH2O to 50 μL
对pMD19-目的基因和表达载体（如PSB130）分别进行酶切;2.9 连接;3.载体构建（同源重组）;3.1目的基因的获得;3.4 PCR产物纯化;3.5 BP反应;3.8 LR反应;4.注意事项;5.常见问题;5.常见问题;5.常见问题;5.常见问题;5.常见问题;5.常见问题;5.常见问题;5.常见问题;5.常见问题;Thank u
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