维生素A和E的测定方法.pdfVIP

GB 12388—1990 中华人民共和国国家标准 食物中维生素 A 和维生素 E 的 测定方法 Method for determination of retinol and tocopherol in foods GB/T 12388—1990 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用高效液相色谱法测定食物中维生素 A 和维生素 E。 本标准适用于食物中维生素 A 和维生素 E 的测定。 第一篇 高效液相色谱法 2 原理 样品中的维生素 A 及维生素 E 经皂化提取处理后，将其从不可皂化部分提 取至有机溶剂中。用高效液相色谱法 C2n 反相柱将维生素 A 和维生素 E 分离，经 紫外检测器检测，并用内标法定量测定。最小检出量分别为 V ：0.8ng，α-B： A 91.8ng：γ-E：36.6ng：δ-E：20.6ng。 3 试剂 实验用水为蒸馏水。试剂不加说明为分析纯。 3．1 无水乙醚：不含有过氧化物。 3．1．1 过氧化物检查方法：用 5mL 乙醚加 1mL 10%碘化钾溶液，振摇 1min， 如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加 4 滴 0.5%淀粉液，水层呈蓝色。 该醚需处理后使用。 3．1．2 去除过氧化物的方法：熏蒸乙醚时，瓶中放入纯铁丝或铁末少许，弃 去 10%蒸馏水和 10%残留液。 3．2 无水乙醇：不得含有醛类物质。 3．2．1 检查方法：取 2mL 银氨溶液于试管中，加入少量乙醛，摇匀，再加入 10%氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。 3．2．2 脱醛方法：取 2g 硝酸银溶于少量水中，取 4g 氢氧化钠溶于温乙醇中。 将两者倾入 1L 乙醇中，振摇后，放置暗处两天（不时摇动，促进反应），经过 滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的 50mL。当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量 适当增加。 3．3 无水硫酸钠。 3．4 甲醇：重蒸后使用。 3．5 重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。 3．6 10%抗坏血酸溶液（m/V）：临用前配制。 3．7 1：1 氢氧化钾溶液。 3．8 10%氢氧化钠溶液（m/V）。 3．9 5%硝酸银溶液（m/V）。 中华人民共和国卫生部中华人民共和国卫生部 1990—03—191990—03—19 批准 199批准 1990—12—010—12—01 实施 实施 GB 12388—1990 3．10 银氨溶液：加氨水至 5%硝酸银溶液中，直至生成的沉淀重新溶解为止， 再加 10%氢氧化钠溶液数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。 3．11 维生素 A 标准液：视黄醇（纯度 85%）或视黄醇乙酸酯（纯度 90%）经 皂化处理后使用，用脱醛乙醇溶解维生素 A 标准品，使其浓度大约为 1mL 相当 于 1mg 视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。 3．12 维生素 E 标准液：α-生育酚（纯度 95%），γ-生育酚（纯度 95%），δ- 生育酚（纯度 95%）。用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素 E 标准品，使其浓度 大约为 1mL相当于 1mg。临用前用紫外分光光度法分别标定此三种维生素 E 的准 确浓度。 3．13 内标溶液：称取苯并[α]芘[纯度 98%]，用脱醛乙醇配制成每 1mL 相当 于 10μg 苯并[e]芘的内标溶液。 3．14 pH1～14 试纸。 4 仪器和设备 4．1 实验室常用设备。 4．2 高压液相色谱仪带紫外分光检测器。 4．3 旋转蒸发器。 4．4 高速离心机 4．