现代分析技术紫外可见吸收光谱法.pptx

;戈延茹、曹恒杰、傅海珍 等. 溶剂浮选分离-紫外分光光度法测定环境水样中罗红霉素残留量. 理化检验:化学分册，2011，47(6)：653-655，658; 抗生素原称抗菌素，是指由细菌、放线菌、真菌等微生物经培养而得到的某些产物，或用化学半合成法制造的相同或类似的物质；也可化学全合成。 抗生素在一定浓度下对病原体有抑制和杀灭作用。 ; 罗红霉素临床用于敏感菌引起的支气管炎、肺炎、扁桃体炎、五官科感染、泌尿系统感染、皮肤和软组织感染等。;1 预处理;　有机化合物结构分析的四大工具; 即紫外－可见分光光度法，属于分子吸光分析法。;;物质的吸收谱带的特征;与同一种化合物的红外光谱比较　;比色法;1. 比色法;（1）目视比色法; 使用棱镜和光栅分光系统，同时可以测得物质的吸光度随入射光波长变化的关系曲线。;A－c 标准曲线偏离朗伯－比尔定律的主要原因;二、紫外－可见分光光度法（紫外－可见吸收谱线法）特点;（4） 应用广泛;一、分子轨道能级和电子跃迁; 价电子主要有三种：形成单键的σ电子、形成不饱和键的π电子以及未参与成键的 n 电子（孤对电子）。;σ－轨道和σ*－键；;电子跃迁;电荷转移跃迁;内氧化还原; 不少过渡金属离子与含生色团的试剂反应所生成的络合物以及许多水合无机离子，均可产生电子跃迁。;电荷转移吸收带的特点;　过渡金属配位形成络合物的过程中，原来能级简并的d－轨道和 f -轨道，由于配位体的场作用而发生能级分裂，若d－轨道（或f -轨道）是未充满的，则可能吸收电磁波，电子由低能级的d－轨道跃（或f -轨道）迁到较高能级空的d－轨道（或f -轨道）而产生吸收光谱。;5.2 紫外－可见吸收光谱法的基本原理;一、发色团、助色团和吸收带;（3）吸收带（R、K、B、E）;③ B 吸收带;;二、影响紫外－可见吸收光谱的因素;共轭效应;超共轭效应 ;溶剂效应;最大吸收位置（λmax）的改变　;　极性溶剂中，n－轨道和π*轨道能量都降低， n－轨道能量降低更显著。; 溶剂极性越大，由π→π* 跃迁所引起的吸收峰红移（长移）距离越大。 ;　　如果羰基化合物处于酸性溶剂中，氧上的n－电子质子化，使 的吸收位置向更短的波段移动，甚至在普通仪器的测量范围内消失。;溶剂的选择原则;pH的影响;苯胺－苯胺离子的结构鉴定;苯酚－苯酚盐的结构鉴定;三、各类有机化合物的紫外－可见特征吸收光谱; 饱和有机化合物;不饱和有机化合物;芳香族化合物;四、最大吸收波长的推算;共轭多烯的λmax计算;四个以上双键的共轭体系，K－带的λmax 和εmax 值;;α，β－不饱和醛酮的λmax;α，β－不饱和酸及酯的λmax　　;苯酰基化合物λmax;教材P68~69例题;五、紫外光谱解析; 解析方法; 解析方法;（A） 六元环α，β－不饱和酮：215＋12×2＝239nm;单环共轭二烯：　　217＋5×4 + 5＝242nm;一、仪器的基本构造;光 源;单色器;检测器;;显示器;二、仪器的类型;单光束分光光度计;双单光束分光光度计;双波长分光光度计;光电二极管阵列分光光度计 ;一、紫外－可见吸收光谱法的误差;;入射光波长的选择 ;吸光度度数范围的选择; 通过改变称样量、稀释溶液以及选择不同厚度的吸收池，来控制吸光度在 0.2～0.7 范围内（透射率为 65％～20％）。　;利用空白试验消除因溶剂或器皿对入射光吸收和反射带来的误差。;溶剂;　紫外光谱的测定都是在稀溶液中进行，要求所用溶剂在样品吸收的波段中没有吸收。;;石???或熔硅玻璃材质：185nm 以上。;配制样品的溶剂应与样品不发生任何化学反应；;一、定性分析;一、定性分析;二、结构分析;;;2.　利用紫外－可见吸收光谱判别有机化合物的同分异构体;;3.　配合物组成的测定;三、定量分析;;;;;;双波长分光光度计法; 此法还可用于测定浑浊样品，吸光度相差很小且干扰又多的样品，及颜色较深样品。;四、示差分光光度法（量程扩展技术）;1. 单标准示差分光光度法;高浓度试液法;低浓度试液法; 以浓度比试液浓度 cx 稍高的参比溶液 cs 调T=0，用浓度比试液浓度 cx 稍低的参比溶液 cs 调T=100%，然后测定待测物质的透射率或吸光度。适用于任何浓度区域差别很小的试液的测定。;五、动力学分光光度法;;固定时间法;;六、导数分光光度法;;七、纯度检查;八、氢键强度的测定;水溶液中，丙酮的 n→π* 吸收带为 264.5 nm；