活性物质与蛋白质相互作用简介_生物学_自然科学_专业资料.pptVIP

活性物质与蛋白质相互作用简介 报告人：王森胜 广西大学化学化工学院 活性物质与蛋白质相互作用简介 蛋白质能与许多内源性和外源性小分子物质结合形成超分子复合物，这些物质与蛋白质结合生成超分子复合物之后，体系的光谱、电化学等性质发生改变从而提供蛋白质浓度或结构方面的信息。小分子与蛋白质相互作用的研究是化学生物学的重要研究内容，能为生命科学、化学及临床药理学提供丰富的信息。 根据小分子物质与蛋白质的相互作用解释蛋白质构象的改变，确定小分子物质与蛋白质的结合位点数、结合常数和主要作用力及其大小是研究的主要内容。 活性物质与蛋白质相互作用简介 。 1、与蛋白质相互作用的小分子类型 。 2.蛋白质的结构 蛋白质的结构分为一级结构、二级结构、三级结构、四级结构。 一级结构是指氨基酸通过肤链有序的连接形成一个多肤链。一级结构的改变可以直接影响二级结构的变化。 二级结构是一级结构中的肤链由于弯曲或折叠产生的。氨基酸排列的顺序决定蛋白质的构象。 蛋白质二级结构又分为a螺旋，p折叠，p转角和无规卷曲。 2.蛋白质种类 1、人血清白蛋白 血清白蛋白是血浆中最丰富的蛋白质，是生物体内具有重要生理功能的大分子，它可以同许多内源性和外源性物质结合，起着重要的储存和运输作用。并且，血液中血清白蛋白浓度长期以来一直是检验健康和疾病的指标。与其它蛋白质相比，血清白蛋白也具有分子量小、水溶性好、稳定性高、易提纯制备等优点，在临床药物研究中一直作为模型蛋白，也是研究高分子蛋白理化性质、结构与功能、临床应用以及变异方面的理想蛋白质。 2.蛋白质种类 2、免疫球蛋白 免疫球蛋白主要存在于血浆中，其它体液、组织液和分泌液中也存在少量免疫球蛋白。免疫球蛋白分为免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)。人体中主要的免疫球蛋白是JgG(图1.7)，它与其它的免疫球蛋白含量之比大约为3:1。免疫球蛋白IgG能够对外界起到抵御作用，从而提高人体自身免疫力。 2.蛋白质种类 3、细胞色素 细胞色素称为血红素，是一种小的球形蛋白，含有104个氨基酸残基。细胞色素分为a、b、c、d四类，即细胞色素a、细胞色素b、细胞色素c、细胞色素d。目前研究最多的是细胞色素c。由于细胞色素c来源困难，实际实验中大多使用马心细胞色素c。 2.蛋白质种类 4、溶菌酶 溶菌酶是在自然界中广泛存在的一种小分子碱性蛋白，是一种与单核一巨噬细胞系统有关的非特异防御机制，长期以来一直被作为一种“模型”体系，用于研究蛋白质的空间构象、酶动力学及其与分子进化、分子免疫间的关系，也是研究蛋白质热力学稳定性很好的模型蛋白质。它在临床上具有潜在的使用价值。 3、活性物质与蛋白质相互作用的研究方法 1 紫外—可见吸收光谱法 2 荧光光谱法 2.1 荧光猝灭法 2.2 荧光增强法 2.3 荧光偏振 3 傅立叶变换红外光谱（FT- IR）法 4 分子模拟的研究和应用 5 其他研究方法 3、活性物质与蛋白质相互作用的研究方法 1 紫外—可见吸收光谱法 在组成蛋白质常见 的 20 种 α- 氨基酸 中只有芳香族氨基酸如色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸和含硫氨基酸在230~310 nm 波长范围内有吸收 ，其紫外吸收 ，主要来源于这些氨基酸 的侧链基团对光的吸收 ，此外肽键对光也有强烈吸收。在蛋白质的紫外吸收光谱 中，280nm 处 的峰是酪氨酸、色氨酸残基中共轭双键 的吸收峰 ，苯丙氨酸的吸收峰出现在 257 nm 波长附近 ，210 nm 处的峰是肽键 的强吸收峰。一般来说 ，氨基酸残基 的微环境由蛋白质分子的构象决定 ，构象改变 ，微环境改变 ，生色基 团的紫外吸收光谱随之发生改变。若小分子配体与生物大分子结合前后的吸收光谱有一定差异时 ，说明蛋白质的构象发生了变化。 3、活性物质与蛋白质相互作用的研究方法 2 荧光光谱法 研究小分子配体与蛋白质的相互作用，荧光光谱法是应用最广泛 的一种方法。该方法能够提供较多的荧光参数如激发光谱 、发射光谱 以及荧光强度、量子产率 、荧光寿命 、荧光偏振等，这些参数从各个角度反映了分子的成键和结构情况 以及发光特性 。通过对这些参数的测定 ，不但可以做一般的定量分析 ，而且还可 以推断蛋白质分子在各种环境中