分光光度法测定果胶酶活性方法研究.pdfVIP

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d28- Vo【15No 黑龙江医药 HeILongJla“gM—d】(::a【Journal 6 2002 分光光度法测定果胶酶活性方法的研究 李忠福徐建国 哈尔滨制药总厂(150086) 摘要本文论述了用分光光度法测定发醇液等成份复杂的样品中果胶酶活性的新方法,标准 曲线相关系数丫一o.999;测定样品相对标准偏差1.90;回收率在90%以上。此方法准确、简便、易 操作、需时短。 关键词 分光光度法;果胶酶活性 DeterminatiOn0fPectinase ActiVityby I,i a1.,丁nr6z”(jP”e7Ⅵr尸^&,。7wⅡcF“fzcdZ Zhonfu,et Fdcf。,叫(1j0086) AbstractAnewmethodfordeterminati。n。f lnflaxwateroffermented pcciinascactl“ty broIh was of studied.-I’hecoefficientcorrelationis standardde bySpcctropllotonletry O.999;The vi“Ionofrelativeis1.90;Therateofco儿ccLlon is tinleisshort curate,opera“ons【mple,and words Key spectrophotomct‘y;pcctinascactlvity 果胶酶(EC3.2.1.15)足指分解果胶质的多种定的范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈比 酶的总称,它可分为两大类:解聚酶和果胶酯酶。果 例关系,可利用比色法进行测定“。。 胶酶广泛存在于植物果实和微生物中。 果胶酶活性国际单位定义为:在pH4.4,dj℃条 果胶酶活性测定一般采用粘度降低法01,此方 件下,每分钟水解果胶质产生1pmol半乳糖醛酸所 法误差较大,不适用于测定发酵液等成分复杂,果胶 需的酶量为一个酶单位。 酶活性又很低的样品。本文所述方法适合测定这样 通过3,5一二硝基水杨酸比色测定D一半乳糖 样品中果胶酶活性,并且结果准确。 醛酸的量可计算出果胶酶活性。 1实验部分 1.2主要仪器及试剂 1.1测定原理 日本岛津可见——紫外分光光度仪、水浴祸 3,5一二硝基水杨酸试剂(又称DNS试剂)“1 饵 由Slgma公司生产。 1.3标准曲线绘制 , 准确配制O.1%D一半乳糖醛酸溶液为标准样, Ⅱ a 按表1在各管中加样。 果胶质主要是由I)半乳糖醛酸以a一1.4糖甙键 表I标准曲线绘制 连接形成的直连状的聚合物。其中,部分D一半乳糖

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