抗人羧酸酯酶Ⅱ多克隆抗体的制备、鉴定和应用.pdf

158 ·论著· 抗人羧酸酯酶一Ⅱ多克隆抗体的制备、鉴定及应用 吴春铃，包红霞，唐晓波，朱大岭拳(哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室，黑龙江省生物医药工程莺点实验室一省 部共建闻家匿点实验室培育基地，药物与内源性物质代谢省高校重点实验室，黑龙江哈尔滨150081) and afoundationforthe of and specificitylays investigationdiag- Preparation，characterizationap- nosiskitofIivercancer． of plicationpolyclonalantibodyagainst [Keywords]hCE-Ⅱ；prokaryoticexpress human protein；polyclonal carboxylesterases-II antibody [摘要]目的：构建人羧酸酯酶．Ⅱ(hCE一Ⅱ)原核表达质粒 WU Xiao—bo，ZHU Chun—ling，BAOHong—xia，TANG 并在大肠杆菌中表达，制备多克隆抗体(pAb)，并对其特性 Da．1ing+ 进行初步鉴定。方法：以人正常肝eDNA文库为模板，构建 of Labof BiopharmaeeuticalDepartment，CollegePharmacy，Key of La- Province，Key BiopharmaceutiealEngineeringHeilongjiang of and SubstanceMetabolismof boratory Endogenous Higher Drug 达，hCE—II-GST融合蛋白作为免疫原免疫大耳白兔，用辛酸． Institutionof Learning HeilongjiangProvince，Harbin150081， 硫酸铵分步沉淀法初步纯化抗血清，并用问接ELISA、West． China elTl blot及免疫组化检测抗体的灵敏度和特异性。结果：成功 制备了抗hCE—lI的多克隆抗体。Western constructa ex- blot鉴定表明该抗 AIM：To [Abstract] prokaryoticplasmid human the 体可特异性识别重组蛋白以及天然的人肝微粒体蛋白。免疫 pressingcarboxyles—terases·11(hCE-11)，purify recombinantand therabbit an— 组织化学鉴定显示该抗体町特异性结合肝