2015年暑期生物化学奥赛理论培训.ppt

九、脂质与生物膜 必需脂肪酸与非必需脂肪酸；不饱和脂肪酸中的双键一般是顺式的； 简单脂、复脂和异戊二烯类脂 脂肪、糖原和蛋白质三大能源贮备之比较 两性脂类（磷脂、糖脂和胆固醇）与生物膜 磷脂分子在水溶液中自组装形成的几种结构 驱动和稳定生物膜结构形成的化学键 三类膜蛋白与脂双层结构的结合方式 脂筏 磷脂分子在水溶液中自组装形成的几种结构 膜蛋白 膜蛋白是生物膜功能的主要执行者，根据它们在膜上的性质，可分成外周蛋白、内在蛋白和脂锚定蛋白。 内在蛋白和脂锚定蛋白主要通过疏水键与膜脂结合 生物膜的性质 流动性（取决于温度和膜的组成）：温度越高流动性越高，不饱和脂肪酸含量越高以及磷脂疏水尾巴越短，膜流动性越高；胆固醇是温度膜流动的缓冲剂。 不对称性 结构不对称性 功能不对称性 物质的选择透过性 离子和小分子物质的跨膜运输 被动运输：不消耗能量；顺浓度梯度而行 (1)简单扩散 (2)易化扩散-需要蛋白质介导的扩散转运方式 （3）通道运输 主动运输：消耗能量；逆浓度梯度而行 (1)ATP驱动的初级主动运输 (2)离子梯度驱动的次级主动运输 运输方式 载体蛋白 饱和动力学 运输方向 能量消耗 简单扩散 无 无 顺浓度梯度 无 通道或孔 有 无 顺浓度梯度 无 易化扩散 有 是 顺浓度梯度 无 初级主动运输 有 是 逆浓度梯度 直接消耗，通常是ATP的水解 次级主动运输 有 是 逆浓度梯度 间接消耗，为离子梯度 跨膜运输的几种方式的比较 跨膜运输的小分子物质的分类 可以直接跨膜的 各种气体 各种脂溶性小分子（如脂溶性激素和脂溶性维生素） 极性的不带电荷的小分子（如乙醇、尿素、水和甘油） 不可以直接跨膜的 离子 极性的不带电荷的小分子（各种己糖） 带电荷的小分子（如氨基酸和核苷酸） 酸水解 核酸分子内的糖苷键和磷酸二酯键对酸的敏感性不同：糖苷键＞磷酸酯键；而嘌呤糖苷键＞嘧啶糖苷键 碱水解 RNA的磷酸二酯键对碱异常敏感，得到2′-或3′-核苷酸的混合物；DNA对碱的作用并不敏感，其抗碱水解的生理意义在于作为遗传物质的DNA应更稳定，不易水解。而RNA（主要是mRNA）是DNA的信使，完成任务后应该迅速降解。 酶促水解 核酸的水解 核酸的抽取 两种核蛋白的分离 蛋白质的去除 核酸的沉淀 电泳 离心 层析 核酸的纯度的检测和定量 核酸的分离、纯化和定量 Sanger发明的末端终止法或双脱氧法 Maxam和Gilbert 发明的化学断裂法 焦磷酸测序与深度测序 DNA一级结构的测定 除了焦磷酸测序法，近几年来，科学家还发明了一些新的测序方法，例如单分子测序法。建立在这些新的测序方法基础之上的高通量测序技术堪称测序技术发展历程的一个里程碑，该技术可以对数百万个DNA分子同时进行测序，操作极为简便，大大节约了成本和时间。这使得对一个物种基因组和转录组进行细致全面的分析成为可能，因此也称其为深度测序（deep sequencing） 深度测序 七、酶与辅酶 酶就是由细胞合成的，在机体内行使催化功能的生物催化剂。 没有酶的反应 有酶催化的反应 酶的定义 主要是蛋白质，极少数是RNA（核酶）。 酶的化学本质 核酶实例 核糖体 核糖核酸酶P 某些类病毒 第一类和第二类内含子 某些snRNA HDV 某些核开关 只能催化热力学允许的反应 反应完成后本身不被消耗或变化，即可以重复使用 对正反应和逆反应的催化作用相同 不改变平衡常数，只加快到达平衡的速度或缩短到达平衡的时间。 酶与非酶催化剂的共同性质 高效性 酶在活性中心与底物结合 专一性 反应条件温和 对反应条件敏感，容易失活 受到调控 许多酶的活性还需要辅助因子的存在，作为辅助因子的多为维生素或其衍生物。 酶特有的催化性质 酶的活性中心也称为活性部位，是指酶分子上直接与底物结合，并与催化作用直接相关的区域。 活性中心由结合基团和催化基团组成。前者负责与底物结合，决定酶的专一性，后者参与催化，负责底物旧键的断裂和产物新键的形成，决定酶的催化能力。但也可能有某些基团两者兼而有之。 酶的活性中心与酶促反应的专一性 属于单纯蛋白质的酶为单纯酶，属于缀合蛋白质的酶为缀合酶或结合酶。 缀合酶除了蛋白质以外，还结合某些对热稳定的非蛋白质小分子或金属离子，它们统称为辅助因子。丧失辅助因子的酶被称为脱辅酶，与辅助因子结合在一起的酶被称为全酶。 辅助因子包括辅酶、辅基和金属离子三类。辅酶专指那些与脱辅酶结合松散、使用透析的方法就容易去除的有机小分子。辅基专指那些与脱辅酶结合紧密、使用透析或超滤的方法难以去除的有机小分子。 单纯酶VS缀合酶 影响酶促反应速率的主要因素包括：酶浓度、底物浓度、反应温度、反应介质的pH和离子强度以及有无抑制剂的存在等。 最重要的因素：酶浓度和底物浓度 影响酶