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第十一章 非发酵革兰阴性杆菌
一、教学大纲要求
非发酵菌的概念、种类和初步鉴定特征。
假单胞菌属的分类、临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。
铜绿假单胞菌的临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。
荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、斯氏假单胞菌的临床意义、细菌特性和实验室检查。
不动杆菌属、寡养单胞菌属、产碱杆菌属和军团菌的临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。
黄杆菌属和莫拉菌属的细菌特性和实验室检查。
二、教材内容精要
非发酵菌的主要特点和分类
非发酵菌(Nonfermentative Bacilli)是一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌;在分类学上分别属于不同的科、属和种,但生化特征十分接近,多为条件致病菌,主要引起院内感染。
非发酵菌包括的菌种较多,主要有下列菌属:假单胞菌属(Pseudomonas)、不动杆菌属(Acinetobacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、伯克菌属(Burkholderia)、产碱杆菌属(Alcaligenes)、无色杆菌属(Achromobacter)、莫拉菌属(Moraxella)、金氏杆菌属(Kingella)、黄杆菌属(Flavobacterium)、艾肯菌属(Eikenella)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、黄单胞菌属(Xanthomonas)、丛毛单胞菌属(Comamonas)、食酸菌属(Acidovorax)等。
若某种未知的革兰阴性杆菌具有以下一种或几种特征,则怀疑其为非发酵菌:
二是根据rRNA-DNA同源研究将假单胞菌科分为5个rRNA群。
rRNAⅢ群的细菌属于丛毛单胞菌科(Comamonadaceae),本科包括两个菌属:丛毛单胞菌属(Comamonas)和食酸菌属(Acidovorax),前者包括土生丛毛单胞菌等三个菌种,后者包括敏捷食酸菌等三个菌种。
rRNA群属于短波单胞菌属(Brevundimonas),包括两个菌种:缺陷短波单胞菌和泡囊短波单胞菌。
rRNA群的细菌属于寡养单胞菌属(Stenotrophomonas),只有一个菌种——嗜麦芽寡养单胞菌。
医院环境用品、临床标本
肉汤培养基 分离培养基
血平板 麦康凯平板
可疑菌落
OF试验 涂片革兰染色
O 革兰阴性杆菌、氧化酶阳性
非发酵菌系列生化反应鉴定到种 产绿脓素、青脓素
42℃生长、极端单鞭毛
乙酰胺酶阳性
铜绿假单胞菌
图11-1 非发酵菌检验程序
(2)标本采集 根据感染部位不同分别采集痰液、分泌物、尿液以及医院环境用品等。
(3)检验方法 非发酵菌鉴定较为复杂,应先进行初步分群(属),然后再进行种的鉴定。初步分群的常用实验为葡萄糖氧化发酵试验(O/F试验)、氧化酶试验、动力观察。再进一步作生化试验进行菌种鉴定。
4.耐药性 假单胞菌属的细菌对有些抗生素天然耐药,临床治疗假单胞菌感染的抗菌药物主要有三类:β内酰胺类、氨基糖苷类和喹诺酮类。按美国临床实验室标准化委员会(National Committee for Clinical Laboratory Standards,NCCLS)P.aeruginosa)是假①典型型,菌落呈灰绿色,大小不一,扁平湿润,边缘不规则,呈伞状伸展,表面常可见金属光泽;②大肠菌样型,菌落圆形凸起,灰白色半透明,似大肠埃希菌菌落;③黏液型,菌落光滑凸起,呈黏液状;④侏儒型,细小,无光泽半透明菌落;⑤粗糙型,菌落中央凸起,边缘扁平,表面粗糙。在血平板上常可见透明溶血环,有生姜气味;在液体培养基中呈混浊生长,表面可形成菌膜,在SS琼脂平板上,该菌经过24h培养形成较小无色半透明菌落,一般不易与沙门菌和志贺菌菌落相区别,但经48h培养菌落中央呈棕绿色。铜绿假单胞菌在普通琼脂平板上生长时,可产生多种色素,主要为绿脓素(为铜绿假单胞菌特征性色素)和青脓素(荧光素),前者为蓝绿色。
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