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3 固液分离
第三讲固 液 分 离;固液分离;一 影响发酵液固液分离的因素;2)发酵液的黏度viscosity :
固液分离速度通常与粘度成反比,粘度越大,固液分离越困难
影响粘度的因素:
菌体的种类和浓度(重要因素),通常丝状菌、动物或植物细胞悬浮液粘度较大,浓度增大,粘度也提高。
培养液中蛋白质、核酸大量存在:通常细胞破碎或细胞自溶后粘度增大。因此细胞破碎的程度应控制,发酵放罐时间要适宜。
培养基成分:如用黄豆粉、花生粉作氮源,淀粉作碳源,粘度都会升高。
此外,某些染菌发酵液,如染细菌,则粘度会增大。
发酵过程的不正常处理,如大量过剩的培养基和消沫油加入,都会使粘度增大。;二 常见的固液分离方法;(一) 过 滤 filtration;过滤介质选择;过滤介质-织物介质;过滤介质-粒状介质;过滤介质-多孔固体介质;;1)实验室用抽滤装置;2)板框压滤机plate and frame filter ;板框压滤机;板框式压滤机在过滤时,悬浮液由离心泵或齿轮泵经滤浆通道打人框内,,滤液穿过滤框两侧滤布,沿相邻滤板沟槽流至滤液出口,固体则被截留于框内形成滤饼。滤饼充满滤框后停止过滤。;板框压滤机;自动板框式压滤机;3)真空转鼓过滤机(rotary-drum vacuum filter);转筒真空过滤机;转筒真空过滤机;带式真空过滤机;结构:;设备;5)硅藻土过滤机 diatomite filter;硅藻土;硅藻土过滤机;
在压力推动下,悬浮液以高速在管状滤膜的内壁作切向流动,利用流动的剪切作用将过滤介质表面的固体(滤饼)移走,而附着在滤膜上的滤饼很薄,因而能在长时间内保持稳定不变的过滤速度;错流过滤特点;(二)离心分离;对于浓度较小,粒径较大,硬度较强的不溶物,可以采用过滤分离。
但当固体颗粒细小而难以过滤时,发酵液不易被过滤纯化,离心操作往显得十分有效。
离心分离是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异,在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。
动植物细胞的收集、细胞碎片和沉淀的分离等常用离心分离。;优点:
分离速度快,
分离效率高、
液相澄清度好;
缺点:
与过滤设备相比,设备投资高、
能耗大、
离心产生的固体浓缩物和过滤产生的浓缩不同。
通常情况下离心只能得到一种较为浓缩的悬浮液或浆体。而过滤可获得的水分含量较低的滤饼。; 对于常速和高速离心机,由于所分离的颗粒大小和密度相差较大,只要选择好离心速度和时间,就能达到分离效果。 ;是一类结构最简单的实验室常用离心机,
指离心管腔与转轴成一定倾角的转子;
角度越大,沉降越结实,分离效果越好,
角度越小,颗粒沉降距离短,沉降速度快,但分离效果差。;平抛式离心机一类结构简单的实验室常用的低中速离心机,转速一般在 3000-6000rpm。
转子活动管套内的离心管,静止时垂直挂在转头上,旋转时随着转子转动,从垂直悬吊上升到水平位置(约200—800rpm)。
颗粒在水平转子中的沉降
是沿管子轴向移动
样品便于收集
但转头结构复杂,
最高转速相对要低
;平抛式离心机转子;3)管式离心机(tubular-bowl centrifuge);管式离心机;结构简单,
可提供较大离心力,转速高,分离因数高达15000-65000。
管状离心机可以冷却,有利蛋白质分离
间歇操作,须定时拆卸、清洗
适用于于分离乳浊液及含细颗粒的稀悬浮液,适用于固含量低于1%,颗粒度小于5微米,黏度大的悬浮液澄清或固液两相密度差较小的分离。;4)碟片式离心机disk-bowl centrifuge;碟??式离心机工作原理;10 机盖
11 沉渣器
12 电机
13 制动
14 齿轮
15 操作水系统
16 空心钵轴;.;碟片式离心机类型;5)螺旋式离心机 scroll-type centrifuge; 原理:转鼓与螺旋以一定差速同向高速旋转,物料由进料管连续引入输料螺旋内筒,加速后进入转鼓,在离心力场作用下,较重的固相物沉积在转鼓壁上形成沉渣层。输料螺旋将沉积的固相物连续不断定推至转鼓锥端,经排渣口排出机外,较轻的液相物则形成内层液环,由转鼓大端溢流口连续溢出转鼓,经排液口排出机外。 ;躲骏塌粥堡累粕鱼召剿盐腹恭酬早向辆拐念澈贩漫添逸瞄圭出多卯汹冶谓3 固液分离3 固液分离;;思考题
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