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国际眼科纵览2006年2月第30卷第I期 IntRevOphthalmol,February2006,Vol30,No.I 综· 述 · 印4亦匆 晌燎杏件 六 眼丰惊痛价 中的命 田 日J卫尘圳 万} }- 了六j土 目民}M 大夕内侈 圳!甲 rl}力竺川 李学民 王薇 [摘要」 印迹细胞法是近年来在临床上应用的一种简单、微创的眼表取材技术，该技术通过特 殊的方式获取眼球表面的细胞样本，进行各种病理染色，帮助诊断眼表疾病。该技术不但可以对结膜 鳞状上皮化生进行分期，而且可以对眼表复层鳞状__匕皮新生物、干眼症、角巩膜缘干细胞缺乏、眼表病 毒感染、维生素A缺乏症、眼表过敏性炎症、结膜色素痣和结膜恶性黑色素瘤等眼表疾病进行辅助诊 断。本文对印迹细胞法的技术特点及其在眼科中的应用进行综述。 【关键词】 眼表疾病/诊断;印迹细胞法 印迹细胞法是临床上一种简单、微创的眼表取 眼球表面取样。并且这种生物膜在潮湿的情况下是 材技术，该技术通过特殊的方式获取眼球表面的细 透明的，更利于进行细胞学检查。 胞样本，进行各种病理染色，帮助诊断眼表疾病。该 二、印迹细胞检查法的技术 技术的早期，主要用于眼表复层鳞状上皮新生物和 (1)材料的选择:印迹细胞是一种取样的方法， 干眼症的诊断[t,2?。目前印迹细胞除可以对结膜鳞 所使用的材料可以选择 目前国际上广泛使用的生物 状上皮化生进行分期，用于帮助诊断眼表复层鳞状 膜和各种特殊处理的滤纸。(2)取样准备:在进行印 上皮新生物和干眼症以外，还可以对角巩膜缘干细 迹细胞检查之前，取样用的生物膜和各种特殊处理 胞缺乏、眼表病毒感染、维生素A缺乏症、眼表过敏 的滤纸都需要经过无菌处理。麻醉:取样前用普鲁 性炎症、结膜色素痣和结膜恶性黑色素瘤等眼表疾 卡因、丁卡因或利多卡因等麻醉剂对患眼进行表面 病进行辅助诊断，并可以对局部使用药物如丝裂霉 麻醉。(3)取样方法:将取样用的生物膜或各种特殊 素C(mitomycinC,MMC)引发的眼表新生物进行随 处理的滤纸的豁附面紧紧贴附于取样处的眼球表 访观察。 面，直到生物膜变为半透明或滤纸变得潮湿为止。 一、印迹细胞检查法的发展 这一过程大约需要10-20秒。(4)标本的保存和处 早在1954年法国人Larmande和Timsitlj就首 理:取下的潮湿的生物膜或滤纸需即刻放入95%酒 次使用印迹细胞法对眼表复层鳞状上皮新生物进行 精中固定，勿将生物膜自然风干。固定后将标本送 诊断。1977年Egbert等[2丁首次使用醋酸纤维滤纸 到实验室，进行各种处理及染色。也可以采取其他 对干眼症患者取样进行印迹细胞法检查，自然风干 特殊的处理方法，如将滤纸的取样一面紧压在镀胶 后行PAS染色，了解患者结膜杯状细胞的密度。这 的载玻片上[sl或将滤纸的取样一面紧压在普通的载 种取样方法患者一般没有痛苦，甚至可以不用麻醉。 玻片上，再将二者一起放人甲醇、乙醇或丙酮中浸泡 醋酸纤维滤纸取样一般可以得到角膜和结膜表面的 处理[[6]。然后再对处理过的载玻片进行各种染色。 1一3层细胞131。 (5)染色方法:所取的样本可以进行H-E,PAS、免疫 1992年以前，大多数印迹细胞检查都是使用各 组化和免疫荧光等各种染色。对干眼症患者进行杯 种特殊处理的醋酸纤维滤纸，使用各种容器送到实 状细胞检查的最佳方式是PAS染色。(6)观察方 验室进行病理染色。随着印迹细胞检查法的发展， 法:染色后用显微镜观察，对于使用不透明滤纸取得 人们对此方法进行了许多改良。如Simon等 〔〕采‘用 的样本，可以通过显微镜直接观察或对样本进行特 一种新型生物膜代替醋酸纤维滤纸收集眼表细胞进 殊处理后再进行观察。 行眼表疾病的诊断。这种新型生物膜是由生物膜和 三、印迹细胞检查法的新进展 圆筒型支架组成，性能稳定，豁附力强，可以直接在 目前印迹细胞检查法采用很多新技术，如免疫