p3XFLAG-CMV-14哺乳动物表达载体说明.pdf

p3XFLAG-CMV-14 编号 载体名称 北京华越洋生物VECT6080 p3XFLAG-CMV-14 p3xFLAG CMV14 载体基本信息 载体名称: p3xFLAG-CMV-14, p3xFLAG CMV14 质粒类型: 哺乳动物细胞表达载体 启动子: CMV 拷贝数: 低拷贝 克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶 载体大小: 6310 bp 5 测序引物: CMV-F: 5-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3 3 测序引物: hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA 载体标签: 3XFLAG (C-端) ，含EK 蛋白酶识别位点 载体抗性: 氨苄青霉素 筛选标记: Neomycin 克隆菌株: -- 宿主细胞（系）: 常用细胞系，如293、Hela 等 CMV 启动子驱动目的蛋白高水平表达；FLAG 标签含 8 个氨基酸残基 （DYKDDDDK），3XFLAG 标签含22 个氨基酸残基；一般位于融合蛋白的 备注: 外表面，具有高度免疫灵敏性，便于检测和纯化目的蛋白；用 EK 蛋白酶可 将3XFLAG 标签切除。 稳定性: 瞬表达 组成型: 组成型 病毒/非病毒: 非病毒 p3xFLAG CMV14 载体质粒图谱和多克隆位点信息 p3xFLAG CMV14 载体简介 p3xFlag-CMV-14 表达载体是一个6.3 kb 的载体，从pCMV5 载体衍生而来，用于在哺 乳动物细胞内瞬表达或稳表达C 末端带有3xFlag 标签的融合蛋白。载体多克隆位点下 游片段编码了三个相邻Flag 抗原表位（Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp ）。这使得能够使用 Flag M2 抗体检测蛋白表达情况。 载体上的人类巨细胞病毒(cytomegalovirus)启动子调控区域促进了 Flag 融合蛋白基因 的转录.氨基糖苷类磷酸转移酶基因(Neo)使得载体具有耐氨基糖苷类例如为G418 的能 力,允许筛选转染成功的细胞株。 P3XFLAG-CMV-14 表达载体是大肠杆菌和哺乳动物细胞的穿梭载体。当使用 SV40 T 抗原表达的宿主细胞系，如COS 细胞，复制和基因组整合效率能够达到最佳最佳状态。 p3xFLAG CMV14 载体序列 ORIGIN 1 CCATTCGCCA TTCAGGCTGC GCAACTGTTG GGAAGGGCGA TCGGTGCGGG CCTCTTCGCT 61 ATTACGCCAG CTGGCGAAAG GGGGATGTGC TGCAAGGCGA TTAAGTTGGG TAACGCCAGG 121 GTTTTCCCAG TCACGACGTT GTAAAACGAC GGCCAGTGCC AAGCTGATCT ATACATTGAA 181 TCAATATTGG CAATTAGCCA TATTAGTCAT TGGTTATATA GCATAAATCA ATATTGGCTA 241 TTGGCCATTG CATACGTTGT ATCTATATCA TAATATGTAC ATTTATATTG GCTCATGTCC 301 AATATGACCG CCATGTTGAC ATTGATTATT GACTAGTTAT TAATAGTAAT CAATTACGGG 361 GTCATTAGTT CATAGCCCAT ATATGGAGTT CCGCGTTACA TAACTTACGG TAAATGGCCC 421 GCCTGGCTGA CCGCCCAACG ACCCCCGCCC ATTGACGTCA ATAATGACGT ATGTTCCCAT 481 AG