脑钠肽(BNP)ELISA 试剂盒说明书 一步法.pdfVIP

脑钠肽（BNP）ELISA 试剂盒说明书 【产品名称】 通用名称：脑钠肽（BNP）ELISA 试剂盒 英文名称：Brain natriuretic peptide(BNP) ELISA kit 【包装规格】 96 人份/盒 【预期用途】 脑钠肽（BNP）ELISA 试剂盒应用于体外诊断定量检测人血清样品中脑钠肽（brain natriuretic peptide,BNP）的水平；临床上可适用于无症状心衰（NYHAⅠ级）的早期诊断，急性心衰(CHF)严重程度 的评价，监测心衰病程的发展和疗效观查及鉴别心源性和非心源性的呼吸困难。 【检验原理】 脑钠肽（BNP） ELISA 试剂盒用夹心式 ELISA 来检测人血清样品中的 BNP 浓度。待测样品或校准品 加入抗 BNP抗体包被的酶标板微孔内，加入生物素化抗人 BNP 抗体溶液与标准或样品中的 BNP 结合，然 后过氧化物酶标记的链霉亲和素再加入孔中，孵育，洗板后，加入 TMB 过氧化物酶底物显色液，反应一 段时间后，每孔加入酶反应终止液，使颜色变黄色，颜色强度与 BNP 含量成比例。用酶标仪在波长 450nm 处测出吸光度（OD 值）。样品中 BNP浓度根据建立的校准曲线计算。 【主要组成成份】 1．可拆酶标板 96wells 2．校准品 1set 3．交联剂（生物素化抗人BNP抗体和HRP标记的链霉亲和素溶解在含0.2% 10m BSA,0.1%聚乙烯醇（PVA）的10mmol/L磷酸盐缓冲溶液（PBS pH7.5）中） l 4．样品稀释液（0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4-7.6）中加入5%新生牛血 50ml 清，0.5% Tween-20和10mg庆大霉素配制的溶液） 6．浓洗涤液（10X浓溶液）（0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4-7.6）中加入 30ml 1%新生牛血清，0.5% Tween-20和20mg庆大霉素配制的溶液） 7．TMB底物显色液（直接使用）（0.1mol/L醋酸缓冲液（pH5.0）中含 2.08mmol/L TMB,12mmol/L过氧化氢和10mmol/L β-环糊精等稳定剂的溶 10ml 液） 8．终止反应液（1.0mol/L H SO 溶液；直接使用） 10ml 2 4 【储存条件及有效期】 避光在 2-8℃的干燥条件下贮存，试剂盒有效期 6 个月。 【适用仪器】 具有 450nm波长检测功能的各种型号的酶标仪。 【样本要求】 1.使用人血清作为样本。避免使用溶血样本、混浊样本或微生物污染的样本。 2.室温（20－25℃）下保存的样本不要超过 8小时。2－10℃保存样本，不超过 48小时。如长期贮 存，请分装后在-70℃下保存，避免反复冻融。 1 【检验方法】 一、试剂配制 1.洗涤液：浓缩洗涤液(10X)用蒸馏水稀释成 1X(至 300ml)，该洗涤液在 4℃下稳定二周。 2.样品应作1:1000 稀释，即 5ul 样品加入 245ul样品稀释液中，混匀(1:50)；然后取10ul 混合液 加入 190ul样品稀释液中，混匀(1:20)。稀释后样品当天立即使用。校准品不稀释直接使用。 二、检测步骤 试剂盒材料应平衡至室温（20-25℃）再试验，取出所需酶标板条。 1.加入 10ul 校准品(Calibrator)系列、10ul 已稀释样品于相应反应板孔中。空白孔内加入 10ul 样品稀释液。 2.每孔加入100ul 交联剂，轻混匀 30秒。室温孵育 45 分钟。