雌性哺乳动物促黄体素受体的研究进展.ppt

雌性哺乳动物促黄体素受体的研究进展 Advancement of Luteinizing Hormone Receptorin in Female Mammal 引言 LHR的结构和分布 LHR基因结构 LHR在卵巢中的表达 结语 引言 促黄体素受体（Luteinizing Hormone Recepter，LHR），即LH受体，是与G蛋白偶联的在哺乳动物生殖过程中起重要作用的糖蛋白激素受体超家族中的一员。LH通过与靶细胞上的LHR结合，激活腺苷酸环化酶系统，引起甾体激素的合成与分泌，参与哺乳动物受精卵着床、性腺发育及功能活动的调节 LHR的结构 LHR属于G蛋白偶联受体（Gprotein- coupled receptor，GPCR）超家族中的糖蛋白受体亚家族成员，LHR的cDNA编码一个分子量为75kDa、含674个氨基酸的糖蛋白 LHR为G蛋白偶联型受体，LHR具有7个跨膜区，4个胞质区以及由3个环状区和N端组成的细胞外区 LHR由两个功能单位组成：细胞外的激素结合域和锚定单元（anchoring unit）。细胞外域含341氨基酸，对LH或hCG有高的亲和力。锚定单元由7个跨膜（transmembrane，TM）胞浆模件（module）构成，具有信号转导和G蛋白偶联功能 LHR的细胞外域有6个潜在的糖基化位点，7个跨膜螺旋被3个细胞内环（IL）和3个细胞外环（EL）连接。细胞外域主要特征为具有大约14个不完全重复富含亮氨酸序列（LRR）。每一个序列大约含有25个氨基酸残基，其功能是负责结合LH。该区域具有结合激素与跨膜区发生反应并介导信号传导的特性。跨膜螺旋具有结合G蛋白特性 研究发现，LHR、FSHR和TSHR具有类似富含Leu重复（LRR） ，重复基序均含有N端的Cys域。在外显子2~8间，这3种受体的LRR区域有43%的同源性；但N端和C端的氨基酸序列同源性下降，表明这些区域与激素特异性有关 LHR细胞内C末端部分（胞内区）由69个氨基酸组成，是发生磷酸化作用的部位。位于LHR尾端的两个同源基序（DSLL或GTALL）可使内吞化的激素-受体复合物由分解途径转向再利用途径 研究发现，在LHR细胞内C末端，大鼠有1个PKC磷酸化共有位点，猪有2个共有位点和1个潜在的氨酸激酶磷酸化位点 LHR的分布 LHR主要分布于性腺组织，即分布于睾丸Leydig细胞、卵巢颗粒细胞和黄体细胞。LHR在胎儿卵巢上没有检测到，但表达于出生早期。LHR也分布在大鼠前列腺、正常乳腺表皮细胞、恶性乳房损伤、恶性乳房肿瘤及几个癌细胞系（T47D、MCF7和ZR75） LHR基因结构 LHR基因编码区由11个外显子和10个内含子组成，1~10外显子编码5′非翻译区和大部分细胞外域，外显子11编码包含一个44氨基酸残基片段的细胞外域、跨膜域及其连接环、细胞浆尾和3′侧翼区 11个外显子被10个内含子分隔，跨越70kb。外显子2~8和10大小相似，有69-81个碱基对组成，外显子1和9有近200个碱基对组成，外显子11则由1000个以上的碱基对组成 外显子3和8是螺旋结构时，外显子1、2、4~6和9是β结构 外显子1编码5′侧翼区，人、大鼠和猪的信号肽及在FSH和TSH均保守的4个Cys残基。2~8外显子富含Leu的重复，基序是由以70bp的间隔部位插入内含子所形成的基因组编码 通过Kytodoplittle亲水性、表面分布概率、抗原指数和糖化为点分析发现外显子1、3、5~10至少部分位于表面，而外显子2可能还有4是隐蔽性的。大鼠、小鼠、猪和人LHR的基因在外显子/内含子/外显子连接处的DNA顺序极其相似，说明这些哺乳动物LHR基因可能出于相同的进化过程中 LHR在卵巢中的表达 FSH可诱导LHR的表达，但主要由LH本身所诱导。对于去垂体的动物，用GH或GH与PRL相结合，可促进LHR表达和阻止去垂体后LHR的消失。LH的脉冲性释放能维持Leydig细胞的LHR和类固醇激素合成酶的水平。然而，内源性或实验性的LH水平的升高，可导致LHR下调和对激素信号的脱敏作用 人LHR外显子10的编码序列对受体在原生质膜的表达是重要的。 外显子9中的Cys257、Cys258，EL1中的 Cys321、Cys331、Cys417及外显子11中的Cys492对于受体的表面表达具有特殊作用，这些残基的突变导致LHR的细胞内滞留，但并不影响激素的结合。在成年Leydig细胞，翻