滨州市沾化冬枣核中活性多糖提取.docVIP

滨州市沾化冬枣核中活性多糖的提取 　　摘要：利用沾化冬枣核为试验材料，进行了冬枣核多糖的提取分离研究。通过单因素试验确定冬枣核中多糖的含量 ，进一步通过正交试验确定了多糖的较优提取条件。结果表明：各因素对枣核多糖提取效果的影响程度从高到低依次为浸提温度浸提时间料液比。综合考虑提取效果与生产成本，对提取条件进行优化，确定了适宜的提取条件：料液比1∶20、浸提温度90 ℃、浸提时间4 h。以期为冬枣的综合加工利用、为从废弃植物材料中提取生物活性成分提供参考 关键词：冬枣核；活性物质；提取 中图分类号：TS255.4 文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2016）20-0117-03 1 引言 沾化冬枣（Zyzyhpus jujuha dates）是鼠李科枣属的植物，是一种晚熟、鲜食、优质枣类种质资源[1]。冬枣富含19种人体所需的氨基酸和多种维生素，有很高的食疗价值和多种保健功效[2] 目前，多糖广泛分布于自然界中，有研究显示具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血糖等多种功效[3]。常见的多糖的提取方法有浸提法、超声提取法、微波法、超高压等方法[4]，而浸提法又是一种最常见的提取方法。超声提取法[5，6]和微波提取法[7，8]是近年来发展起来的提取方法，具有选择性高、能耗低、效率高等优点，已被广泛应用于多糖的提取 对沾化冬枣的开发利用研究主要集中在冬枣果肉果皮中活性物质的提取，但是对冬枣核活性物质的提取没有进行深入探讨。冬枣采后不仅可以鲜食，而且可以用于加工各种饮料，营养保健品。但加工过程中枣核往往被废弃掉，因此，对冬枣核中活性物质提取的探究，将有助于枣核的开发利用 2 材料与方法 2.1 材料的来源 从市场上采购滨州沾化冬枣，取出枣核，烘干至恒重后用微型试样粉碎机粉粹，过筛，置于棕色瓶中并低温保存，备用 2.2 实验仪器与药品试剂 2.2.1 实验仪器 所用实验仪器如表1所示 2.2.2 实验药品及试剂 实验药品及试剂葡萄糖，浓硫酸，苯酚，无水乙醇，氢氧化钠，乙醚，丙酮，氯仿，30%过氧化氢 2.3 实验方法 2.3.1 标准曲线的建立 采用硫酸――苯酚法绘制标准曲线，可以得到回归方程[5]。回归方程为A=0.00927x+0.00353，线性系数R2=0.99917 2.3.2 多糖的提取 采用微波辅助浸提法提取多糖，每次称取冬枣枣核粉4 g，按一定的料液比混合成溶液，微波处理后浓缩至原体积的1/4，再经过离心、去杂蛋白、真空干燥、脱色、乙醇沉淀等步骤得到多糖浸提液。研究分热水浸提法条件优化和乙醇沉淀多糖工艺条件优化2项试验进行。均以枣核多糖的提取率为浸提条件的优化指标，筛选最佳水平的组合 2.3.3 多糖含量的测定 精密吸取多糖浸提溶液1 mL，置于试管中，加入6%的苯酚1.0 mL，混匀，迅速加入浓硫酸5 mL，混合均匀，静置10 min，置于沸水浴中加热25 min，于490 nm处比色法测定吸光值，将所测吸光值代入标准曲线的多糖含量 提取率（%）=m2/m1×100； m2=CV×10-3 式中：m1为枣核核粉的质量（g），m2为粗多糖的质量（g），C为提取液的浓度（mg/L），V为提取液的体积（L） 2.3.4 多糖提取的单因素实验 采用乙醇水溶液作为浸提溶剂提取枣核中多糖，分别考查时间、温度、料液比对多糖提取率的影响 （1）浸提时间对多糖得率的影响 准确称取4 g枣核粉3份，按 1∶15（g/mL）料液比加入60%乙醇溶液于 80℃条件下分别加热 2、3、4 h，测定各提取液的吸光度，计算得出多糖得率 （2）温度对多糖得率的影响 准确称取4 g枣核粉3份，按1∶15（g/mL）料液比加入60%乙醇溶液在提取2h的条件下，分别在80℃、90℃和100℃下加热提取，测定各提取液的吸光度，计算得出多糖得率 （3） 料液比对多糖得率的影响 准确称取4 g枣核粉3份，加入60%乙醇溶液在90℃的条件下提取2 h，分别以1∶10（g/mL）、1∶15（g/mL）和1∶20（g/mL）的料液比，测定各提取液的吸光度，计算 3 结果与分析 3.1 枣核中粗多糖的微波辅助提取工艺工艺单因素试验 3.1.1 热水浴时间对枣核多糖提取率的影响 由图1得对多糖提取率的影响：固定乙醇60%，料液比1∶15，温度80 ℃水浴锅水浴时间对提取率的影响较大，有正反两个方面的影响，在提取初期，增加热水浴时间有利于活性物质的提取，当热水浴时间超过一定的时间后，活性物质的得率明显下降，这是由于热水浴加热一定时间内对植物细胞的破坏有利于植物活性物质的溶出，而过长时间